膝關節(jié)軟骨受創(chuàng)傷后和髕下脂肪墊之間相互作用關系的研究.pdf

1、目的:為更好地研究創(chuàng)傷性骨關節(jié)炎的機理，我們需要考慮周邊組織對軟骨組織代謝的影響。髕下脂肪墊作為關節(jié)囊內(nèi)，滑膜外的脂肪組織，過去僅被認為起著機械緩沖作用，其對軟骨代謝的生物學作用尚不清楚。這里我們將建立基于彈簧的定量應力撞擊模型來模擬創(chuàng)傷性骨關節(jié)炎疾病中的創(chuàng)傷軟骨，然后觀察創(chuàng)傷軟骨早期分泌的促炎癥因子及其他指標的變化，進而探討髕下脂肪墊和創(chuàng)傷軟骨之間的相互作用。
　　方法:采用基于彈簧胡克定律的模型，制造了定量應力的軟骨創(chuàng)傷模型，

2、然后分析牛膝關節(jié)軟骨對不同應力的反應，確定合適的撞擊應力值;再通過分析不同時間點創(chuàng)傷軟骨的細胞死亡率、GAG丟失、PGE2的釋放、一氧化氮的釋放等指標，確定最佳的研究軟骨早期創(chuàng)傷反應的時間點;然后將經(jīng)過髕下脂肪墊處理的溶液用于培養(yǎng)創(chuàng)傷軟骨，分析創(chuàng)傷軟骨對髕下脂肪墊的反應;最后，收集創(chuàng)傷軟骨的分泌物質(zhì)用于培養(yǎng)髕下脂肪墊來源的脂肪干細胞及脂肪細胞，分析相關脂肪因子及促炎因子的表達。
　　結果:通過我們設計的裝置，軟骨在受到不同應力時，

3、軟骨細胞死亡率、PGE2釋放、一氧化氮釋放及GAG降解等生物學反應會有不同，最終我們選取36MPa用于下一步實驗;通過分析不同時間點各指標的釋放，我們確定48小時為合適的研究早期軟骨降解的時間點，且分析出TNF-α而非IL-1β或IL-6為創(chuàng)傷后由軟骨自身釋放的主要促炎細胞因子。通過使用髕下脂肪墊組織培養(yǎng)過的培養(yǎng)液培養(yǎng)創(chuàng)傷軟骨發(fā)現(xiàn)，髕下脂肪墊僅對創(chuàng)傷軟骨有進一步降解的作用，表明在正常生理狀態(tài)下髕下脂肪墊起著穩(wěn)定軟骨代謝平衡作用，在軟骨創(chuàng)

4、傷后暴露了一些受體或信號，促使髕下脂肪墊起反應而進一步促進軟骨的降解，我們分析認為是IL-6通過升高iNOS并降低TIMP1/2/3的表達來發(fā)揮作用。進一步，我們分析了創(chuàng)傷軟骨釋放的信號對髕下脂肪墊主要兩類細胞ADSC及DFAT作用發(fā)現(xiàn)，其會促進ADSC及DFAT的IL-6高表達，而不影響其他脂肪因子及促炎因子。
　　結論:我們設計的定量軟骨創(chuàng)傷模型能較好模擬軟骨創(chuàng)傷后反應，可廣泛用于創(chuàng)傷性骨關節(jié)炎的研究，我們認為促炎因子TNF-