1,25(OH)2D3對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠肺臟病變的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景:糖尿病是一種以持續(xù)性高血糖為特征的代謝性疾病，長(zhǎng)期碳水化合物以及脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂可引起心臟、腎臟、肺臟等多個(gè)組織器官的損傷。TLR4是天然免疫模式識(shí)別受體家族的成員之一，可參與機(jī)體的天然免疫反應(yīng)及多種慢性炎癥性疾病的病理生理過程。糖尿病腎病、糖尿病視網(wǎng)膜病變、糖尿病神經(jīng)病變以及糖尿病大血管病變都與TLR4有關(guān)。1，25-(OH)2D3即骨化三醇，是一種具有生物活性的類固醇激素，不僅可以調(diào)節(jié)鈣磷代謝，還可控制細(xì)胞的增殖和分化，在

2、免疫功能的調(diào)節(jié)和炎癥防御方面具有重要作用。但目前關(guān)于糖尿病肺臟病變的研究較少，亦不明確1，25-(OH)2D3對(duì)糖尿病肺組織病變的影響及其作用機(jī)制。
　　目的:本研究觀察不同劑量的1，25(OH)2D3能否通過下調(diào)肺臟TLR4介導(dǎo)的炎癥途徑對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠肺臟發(fā)揮保護(hù)作用。
　　方法:將90只SD大鼠隨機(jī)分正常對(duì)照組（C，10只）和糖尿病模型組（S，80只）。S組一次性尾靜脈注射鏈脲佐菌素(45mg/kg)以制備DM

3、大鼠模型。將造模成功的糖尿病大鼠隨機(jī)分為五組，包括糖尿病未干預(yù)組(D)、1，25-(OH)2D3高、中、低劑量組(H、M、L)及精蛋白鋅胰島素組(Y)。分別給予H、M、L組大鼠0.3μg· kg-1· d-1、0.15μg·kg-1·d-1、0.025μg·kg-1·d-11，25-(OH)2D3灌胃，Y組給予16U·kg-1·d-1胰島素頸后皮下注射，D和C組給予蒸餾水2ml·d-1灌胃。各組大鼠于成模16周后處死。取一部分肺臟于10

4、％中性福爾馬林溶液中保存，以HE、Masson染色觀察肺組織的形態(tài)學(xué)變化，以免疫組化檢測(cè)TLR4、NF-κB p65的表達(dá);其余組織則立即凍存于液氮中，用于TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA的定量分析。
　　結(jié)果:DM各組血糖及血清CRP水平均顯著高于C組(P＜0.05)，H、M、L、Y組不同程度低于D組，尤以H組和Y組為著(P＜0.05)。各組大鼠血鈣和血磷比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。各DM組尿鈣均較C組

5、明顯增高(P＜0.05)，其中M組增高最顯著。同D組相比，M組尿鈣明顯增高(P＜0.05)，H、L、Y組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各DM組PTH均較C組顯著增高(P＜0.05)，其中D組增高最明顯。同D組相比，H、M、L組PTH顯著降低(P＜0.05)，其中H組降低最明顯。組織學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，D組肺泡隔重度增厚，肺間質(zhì)明顯增生，存在大量的炎癥細(xì)胞浸潤。H、M、L、Y組可見肺泡隔輕到中度增厚，亦可見炎細(xì)胞癥明顯浸潤。免疫組化檢查發(fā)現(xiàn)，D組TLR4

6、、NF-κB p65蛋白的表達(dá)較C組明顯增加，不同劑量的1，25-(OH)2D3干預(yù)后，其表達(dá)水平有所下降。D組TLR4、MyD88和NF-κB p65 mRNA的表達(dá)顯著高于C組(P＜0.01)，不同劑量的1，25-(OH)2D3干預(yù)后，各組的mRNA表達(dá)水平均有所下降，且TLR4與MyD88、TLR4與NF-κB p65、MyD88與NF-κB p65的表達(dá)具有相關(guān)性。
　　結(jié)論:1，25-(OH)2D3可能通過TLR4介導(dǎo)的