人工蟲草對STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠肺臟的保護(hù)作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:近年來，肺臟作為糖尿病慢性并發(fā)癥的另一靶器官引起人們的廣泛關(guān)注。國內(nèi)外研究證實(shí)，糖尿病早期即可引起肺臟組織形態(tài)學(xué)改變，如肺泡上皮細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺間質(zhì)膠原纖維的增生，進(jìn)而影響肺通氣功能和彌散功能，可進(jìn)一步發(fā)展為肺間質(zhì)纖維化。近年研究表明炎癥在糖尿病及其慢性并發(fā)癥的發(fā)生及發(fā)展中起著重要的作用。細(xì)胞核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming growth

2、 factor-β1，TGF-β1)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal Kinase，JNK)均為重要的炎癥因子，現(xiàn)有研究認(rèn)為NF-κB、TGF-β1、JNK的異常表達(dá)與糖尿病肺纖維化密切相關(guān)。冬蟲夏草(Cordyceps sinensis(Berk.) Sacc，CS)是我國特有的名貴中藥材，具有補(bǔ)肺益腎的功效。既往研究發(fā)現(xiàn)蟲草制劑對糖尿病所致肺損傷有一定的治療作用，但具體機(jī)制尚不明確。本研究通過觀察人工發(fā)酵蟲

3、草菌絲體干粉和吡格列酮進(jìn)行干預(yù)的糖尿病大鼠肺臟的病理變化及肺臟組織中NF-κB、TGF-β1、JNK表達(dá)變化情況，探討NF-κB、TGF-β1、JNK與糖尿病肺臟損傷發(fā)生的關(guān)系，以及人工蟲草對肺臟保護(hù)作用機(jī)制。
　　方法:90只雄性8周齡SD大鼠，隨機(jī)抽取10只為正常對照組（N組），其余作為實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組大鼠以STZ造模，成模大鼠根據(jù)血糖水平分層，隨機(jī)分為糖尿病組（D組），CS小劑量組(L組，0.6g/kg·d)，CS中劑量組(M

4、組，2.5g/kg·d)，CS大劑量組(H組，5g/kg·d)和吡咯列酮組(P組，4mg/kg·d)。成模8周后處死全部動(dòng)物。留取血標(biāo)本檢測血脂。留取肺臟標(biāo)本做HE、MASSON染色觀察光鏡病理組織學(xué)變化，通過免疫組化及RT-PCR法檢測肺臟組織NF-κB、TGF-β1蛋白及NF-κB、TGF-β1、JNKmRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.糖尿病大鼠模型成功建立。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，D組大鼠TC、TG較正常對照組明顯升高（P＜0.05

5、），各CS治療組明顯低于D組（P＜0.05）。3.HE和Masson染色結(jié)果示:與N組相比，D組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，可見肺大泡及部分肺泡腔萎縮、塌陷，肺泡隔增寬，膠原纖維增多，排列紊亂，肺臟呈現(xiàn)出纖維化趨勢，并有大量炎癥細(xì)胞浸潤。與D組相比，CS各干預(yù)組和P組大鼠肺組織病變有所減輕，其中H組與P組優(yōu)于L、M組。4.免疫組化結(jié)果顯示:D組大鼠NF-κB、TGF-β1在肺組織中較N組表達(dá)明顯增加;與D組相比，各CS劑量組和P組大鼠肺NF-κ

6、B、TGF-β1表達(dá)均有不同程度下調(diào);H組、P組表達(dá)水平明顯低于L及M組。5.RT-PCR結(jié)果示:D組大鼠肺臟NF-κB mRNA、TGF-β1mRNA和JNKmRNA表達(dá)較N組明顯增加;與D組相比，各CS劑量組和P組大鼠肺臟NF-κB mRNA、TGF-β1 mRNA和JNKmRNA表達(dá)水平均有不同程度降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);其中H組和P組表達(dá)低于L、M組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.STZ