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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察1,25-二羥維生素D3(1,25(OH)2D3)對(duì)2型糖尿病伴牙周炎患者中性粒細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)因子caspase-3,bax,bcl-2表達(dá)情況,探討p38MAPK信號(hào)通路在1,25(OH)2D3對(duì)2型糖尿病伴牙周炎患者中性性粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制。
方法:
2015年9月至2016年7月收集遵義市遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科有2型糖尿病并伴有牙周炎患者76例(男52例,女24例),采集患者外周
2、血10ml,采用密度梯度離心法分離中性粒細(xì)胞,分為空白組(control組)、1,25(OH)2D3誘導(dǎo)組(medication組)、1,25(OH)2D3+SB203580D誘導(dǎo)組(medication+blocker組),使用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)觀察細(xì)胞凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡技術(shù)(Western Blot)檢測(cè)p38MAPK信號(hào)通路相關(guān)蛋白p38、p-p38,凋亡蛋白 caspase-3、bax、bcl-2的表達(dá);實(shí)時(shí)定量PCR(RT
3、-PCR)檢測(cè)p38、caspase-3、bax/bcl-2mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
1.FCM結(jié)果顯示:通過(guò)使用濃度為10-8mol/L的1,25(OH)2D3作用于細(xì)胞24小時(shí)后,medication組凋亡率最高,medication組及medication+blocker組凋亡率均高于control組,兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
2.Western Blot結(jié)果顯示:1,25(OH)2D
4、3作用后,medication組磷酸化p38(p-p38)、caspase-3及bax蛋白表達(dá)最高,其次為medication+blocker組,control組最低,bcl-2蛋白的表達(dá)medication組灰度值最低,其次為medication+blocker組,control組最高。
3.RT-PCR結(jié)果顯示:control組、medication組、medication+blocker組p38mRNA水平組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)
5、學(xué)差異(P>0.05);caspase-3、bax/bcl-2的mRNA水平在medication組高于control組和medication+blocker組,medication+blocker組高于control組,組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
結(jié)論:
1.1,25(OH)2D3可通過(guò)激活P38MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)2型糖尿病伴慢性牙周炎患者中性粒細(xì)胞的凋亡。
2.1,25(OH)2D3
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