CDX2在潮汕賁門癌中的表達.pdf

1、背景和目的：
　　潮汕地區(qū)是食管鱗癌(Esophgaeal sqmuaous cell careinoma,ESCC),也是賁門癌(Gastric Cardia Carcinoma,GCA)高發(fā)區(qū)之一,幽門螺桿菌(Helicobacter pylori, H.pylori)感染是胃粘膜腸化的主要致病因素,也被證實為遠側(cè)部胃癌的病因,但幽門螺桿菌感染與賁門癌的關(guān)系尚存爭議。本課題組前期的研究發(fā)現(xiàn),潮汕地區(qū)的賁門癌患者及普查人群幽門螺

2、桿菌的感染率遠高于我國自然人群平均感染率,而且H.pylori感染與賁門慢性炎癥,腫瘤細胞增生密切相關(guān),提示潮汕地區(qū)的賁門癌發(fā)生與H.pylori感染有關(guān)。
　　尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2(Caudal-related homeobox transcription factor2, CDX2)是一種腸道上皮特異性基因,對腸上皮細胞的分化、增殖、凋亡和腸道特定基因的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用。目前許多研究并發(fā)現(xiàn)值得注意的是, CDX2并不完全局限于正

3、常組織尤其是腸道的表達,研究人員相繼發(fā)現(xiàn) CDX2在胃癌,結(jié)直腸癌,甲狀腺癌,卵巢癌,子宮內(nèi)膜腺癌,膀胱癌和前列腺腺癌等也見其可表達。有研究表明H.pylori感染可引起CDX2在胃黏膜中異常表達。而目前CDX2在潮汕地區(qū)的賁門癌中的表達報道較少,而在賁門組織中探討幽門螺桿菌感染與CDX2蛋白表達相關(guān)文獻則幾乎沒有。
　　本實驗擬采用改良Giemsa染色和H.pylori特異性免疫組織化學(xué)標(biāo)記染色檢測幽門螺桿菌在賁門普查標(biāo)本和賁門

4、癌中的分布和表達情況,運用免疫組化方法檢測CDX2蛋白的表達,探討H.pylori感染和CDX2蛋白表達的關(guān)系,進一步加深H.pylori在賁門癌變過程中作用及相關(guān)改變的了解。
　　材料和方法：
　　材料：
　　所有患者術(shù)前均未行放療化療。所有組織標(biāo)本均經(jīng)10％中性福爾馬林液固定,常規(guī)脫水、透明、浸蠟及石蠟包埋。所有病理標(biāo)本經(jīng)HE染色后觀察核對均符合組織學(xué)診斷標(biāo)準。
　　143例賁門癌及賁門普查組織石蠟標(biāo)本,分兩

5、組:
　　2008年至今在汕大醫(yī)學(xué)院病理科收集的賁門癌標(biāo)本共60例,其中男性52例,女性8例,最小年齡43歲,最大年齡78歲,平均年齡62.80歲;
　　汕頭大學(xué)第一附屬醫(yī)院,腫瘤醫(yī)院胃鏡室及揭陽市人民醫(yī)院病理科收集普查標(biāo)本共83例,其中男性49例,女性34例,最小年齡22歲,最大年齡77歲,平均年齡54.04歲。
　　方法：
　　1.HE染色
　　觀察賁門普查組織中的腸化現(xiàn)象及賁門癌的組織學(xué)類型,分化程度

6、,黏膜的炎癥反應(yīng)程度和上皮增生情況。
　　2.免疫組織化學(xué)染色
　　CDX2多抗染色檢測其表達情況,用幽門螺桿菌特異性抗體標(biāo)記幽門螺桿菌,觀察其在組織中的感染分布。
　　3.圖像分析法
　　應(yīng)用Leica IM50圖像采集系統(tǒng)和Image-Pro Plus6.0圖像分析系統(tǒng)對CDX2染色結(jié)果分析,計算每張切片的陽性標(biāo)記指數(shù)( labelling index,LI)。
　　4.統(tǒng)計分析
　　應(yīng)用SPSS

7、17.0對統(tǒng)計結(jié)果進行分析,采用卡方檢驗,Spearman相關(guān)分析。
　　結(jié)果：
　　1.分組
　　經(jīng)HE染色診斷正常賁門黏膜7例;賁門炎癥組織76例,其中腸化生黏膜11例,非腸化生65例;賁門癌60例。
　　2. CDX2的表達情況
　　CDX2在7例正常賁門組織表達均為陰性,賁門炎癥組織CDX2陽性率13%(10/76),其中輕度(+)4例,中度(++)2例,重度(+++)4例,表達與性別和年齡無關(guān)(p

8、>0.05)。其中腸化生黏膜CDX2陽性表達率為90.9%(10/11),明顯高于無腸化組(p<0.01)。
　　60例GCA中32例(65%)CDX2表達陽性,其中低表達(+)15例,中表達(++)8例,高表達(+++)9例,與性別、年齡、病理類型、浸潤深度及分化程度無關(guān)(p>0.05),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(p<0.05)。
　　CDX2蛋白的表達在賁門炎腸化生組最高,賁門癌組也有表達而正常組無表達,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0

9、.05)。
　　3. CDX2蛋白表達與幽門螺桿菌定值密度的關(guān)系
　　正常賁門組織中 H. Pylori感染率為57.1%(4/7),賁門炎和賁門癌中感染率分別為77.6%(59/76)和68%(41/60)。將賁門炎和賁門癌組織按H. pylori是否表達分組,H. pylori陽性組CDX2表達陽性率與H. pylori陰性組無明顯差別,無統(tǒng)計學(xué)意義( p>0.05)。幽門螺桿菌定值密度與CDX2表達水平標(biāo)記指數(shù)等級高度