5-氟尿嘧啶乳酸—羥基乙酸共聚物納米粒的制備及其體外抑制肝癌細(xì)胞Huh7增殖作用的研究.pdf

1、化療是治療肝癌的常用方法之一，但是因化療藥物缺乏選擇性，常對機(jī)體產(chǎn)生毒副作用，從而大大限制了其廣泛應(yīng)用。目前，在藥物傳輸系統(tǒng)領(lǐng)域，納米粒載藥系統(tǒng)是一種新型的極富發(fā)展?jié)摿Φ陌邢蚪o藥系統(tǒng)。它是納米技術(shù)與現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)結(jié)合的產(chǎn)物，通過改變藥物體內(nèi)分布和藥動學(xué)過程，使藥物在靶區(qū)高濃度富集，有效控制藥物釋放，從而提高療效、降低毒副作用。尤其在腫瘤治療領(lǐng)域，納米粒載藥系統(tǒng)具有廣闊的應(yīng)用前景。本研究旨在制備負(fù)載5-氟尿嘧啶（5-fluorouraci，5

2、-FU）的載藥納米粒，期望將來為肝癌治療提供一個新途徑。
　　【目的】
　　以乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）為載體，構(gòu)建負(fù)載5-FU的載藥納米粒（5-FU-PLGA），并探索其體外對肝癌細(xì)胞Huh7增殖的抑制作用。
　　【方法】
　　利用復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制備5-FU-PLGA納米粒。場發(fā)射掃描電鏡觀察納米粒表面形態(tài)；激光粒度分析儀測定粒徑分布并計算成球率；紫外分光光度計測定5-FU載藥率、包封率，并對體外釋藥進(jìn)

3、行評估；將Huh7細(xì)胞與納米粒共培養(yǎng)24h，利用熒光顯微鏡和透射電鏡觀察納米粒進(jìn)入細(xì)胞的情況；分別將不同濃度的5-FU-PLGA納米粒、5-FU裸藥與Huh7細(xì)胞共培養(yǎng)24h、48h、72h、96h、120h、144h，利用MTT法評價各組細(xì)胞存活率；利用流式細(xì)胞術(shù)測定Huh7細(xì)胞凋亡率。
　　【結(jié)果】
　　納米粒呈球性，平均粒徑為（186±14）nm，成球率為70.8％，載藥率和包封率分別為6.6％和28.1％，體外釋藥表

4、明納米粒具有緩釋性，10d內(nèi)5-FU累積釋藥量達(dá)83.6％；熒光顯微鏡和透射電鏡均證實納米?？梢赃M(jìn)入Huh7細(xì)胞內(nèi)；MTT示，隨著時間的延長，5-FU-PLGA納米組和5-FU裸藥組細(xì)胞存活率均逐漸降低，差異有顯著性（P<0.001）；同一時間點(diǎn)，5-FU-PLGA納米組細(xì)胞存活率低于5-FU裸藥組，差異有顯著性（P<0.001），且20μg/mL5-FU-PLGA納米組抑制細(xì)胞增殖作用最強(qiáng)，144h后細(xì)胞存活率為（20.3±1.25）

5、％；5-FU-PLGA納米組與5-FU裸藥組細(xì)胞144h后均有凋亡，且5-FU-PLGA納米組凋亡率高于5-FU裸藥組，差異有顯著性（P<0.001），20μg/mL5-FU-PLGA納米組凋亡率最高，達(dá)（81.0±3.8）％。
　　【結(jié)論】
　　成功制備5-FU-PLGA納米粒，體外具有緩釋效應(yīng)，可被Huh7細(xì)胞內(nèi)吞并在胞質(zhì)緩慢、持續(xù)釋放5-FU，有效抑制Huh7細(xì)胞增殖，效果好于5-FU裸藥，尤以20μg/mL濃度為著。