電針對帕金森病模型大鼠紋狀體星形膠質(zhì)細胞活化與Cx43表達的影響研究.pdf

1、目的：帕金森?。≒arkinson’s Disease，PD）是中老年人群中最常見的慢性、病程呈進行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，在老年人中有較高的患病率和致殘率。我國現(xiàn)在罹患帕金森病的人數(shù)已超過100萬，而在65歲以上的人群中，PD的發(fā)病率為2％，年齡越高患上PD的概率越大。隨著我國步入老齡化社會，預計未來的20年我國的帕金森病患者將達到500萬。PD在臨床主要表現(xiàn)為靜止性震顫、肌張力增高、運動遲緩和姿勢反射障礙,部分患者還有智力的減退

2、甚至殘障，嚴重影響患者的健康和生存能力。PD的主要特征是中腦的黑質(zhì)紋狀體通路的功能減退，病理表現(xiàn)為黑質(zhì)致密區(qū)多巴胺能神經(jīng)元變性壞死并伴有胞漿內(nèi)嗜酸性包涵體—路易小體（lewy bodies，LB）的形成。
　　PD的發(fā)病機制目前仍不明確，在對多巴胺能神經(jīng)元變性、死亡機制研究的過程中，發(fā)現(xiàn)在帕金森病患者和動物模型中的黑質(zhì)致密部，除了已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的大量多巴胺能神經(jīng)元缺失外，還有星形膠質(zhì)細胞的激活。通過現(xiàn)有的研究結果，發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細胞在帕金

3、森病的發(fā)病過程中有一定作用。本課題采用立體定向注射法,向單側的紋狀體內(nèi)兩點微量注射六羥基多巴胺來制備大鼠旋轉的PD模型，通過觀察電針對帕金森病模型大鼠行為學的改變、黑質(zhì)損毀側酪氨酸羥化酶陽性神經(jīng)元的計數(shù)、中腦損毀側紋狀體Glu濃度的變化以及GFAP、Cx43表達的影響，來探討星形膠質(zhì)細胞在大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元損傷中的可能機制以及針刺干預的影響，以期為PD的針刺治療開辟新的思路。
　　方法：將140只健康雄性SD大鼠，隨機分為正常

4、組、假手術組、模型組、電針組。正常組、假手術組各30只，模型組、電針組各40只。用微量注射法向大鼠右側紋狀體注射6-羥基多巴胺制備偏側PD大鼠旋轉模型,假手術組以生理鹽水替代6-羥基多巴胺進行微量注射。正常組、模型組、假手術組不做任何治療；電針組在造模的基礎上電針“風府”“太沖”穴，采用連續(xù)波，頻率2Hz，強度1mA,持續(xù)30min,一日一次，治療兩周。電針治療結束后，（1）用旋轉行為測試儀觀察大鼠的旋轉行為，（2）運用免疫組化檢測損毀

5、側黑質(zhì)TH陽性神經(jīng)元的數(shù)目，（3）運用HPLC熒光法檢測損毀側紋狀體Glu濃度，（4）采用RT-PCR法檢測大鼠損毀側紋狀體部GFAPmRNA、Cx43mRNA表達的變化，（5）采用western-blot法檢測損毀側紋狀體部GFAP、Cx43蛋白活性表達的變化。
　　結果：（1）行為學觀察，與模型組比較，電針組旋轉行為明顯改善（P<0.01）。（2）與正常組、假手術組比較，模型組TH陽性神經(jīng)元的數(shù)目明顯減少（P<0.01）；與模

6、型組比較，電針組TH陽性神經(jīng)元的數(shù)目明顯增多（P<0.05）。（3）與正常組、假手術組比較，模型組Glu濃度顯著升高（P<0.01）；與模型組比較，電針組Glu濃度顯著降低（P<0.01）。（4）與正常組、假手術組比較，模型組GFAPmRNA、Cx43mRNA表達顯著升高（P<0.01），與模型組比較，電針組GFAPmRNA、Cx43mRNA表達顯著降低（P<0.01）。（5）與正常組、假手術組比較，模型組GFAP、Cx43蛋白表達顯著