人腦膠質瘤中Cx43基因表達及其與細胞增殖的關系.pdf

1、目的：顱內腫瘤占全身腫瘤的2％，年發(fā)病率1/萬，膠質瘤是顱內最常見的惡性腫瘤。近年來外科手術、放療、化療等綜合治療已廣泛應用于膠質瘤的治療，使病人在一定程度上得到暫時緩解，但復發(fā)率高、預后未能根本改善，尤其是高度惡性膠質瘤。其原因之一就是膠質瘤的生物學行為極為復雜，臨床神經外科對其還缺乏足夠的認識，是目前膠質瘤研究的難題。隨著分子生物學的發(fā)展及其在腫瘤學研究中的應用，人們已認識到腫瘤的發(fā)生是原癌基因的激活和抑癌基因的突變、失活所致。近年

2、研究表明，連接蛋白基因在許多腫瘤中表達明顯受到抑制，以Cx基因作為基本結構和功能單位的間隙連接所介導的細胞間隙連接通訊(GJIC)中斷，因此，Cx基因和GJIC可能在腦膠質瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。 Cx是一個多基因家族編碼的蛋白質，目前發(fā)現有13個成員。鑒于Cx基因表達的組織特異性，在成人腦組織中主要表達Cx43及Cx32，其中星形細胞表達Cx43，少支膠質細胞及某些神經元細胞表達Cx32。有關Cx43基因在膠質瘤中的表達，

3、目前國外僅有小宗腦膠質瘤標本及膠質瘤體外細胞系的研究，尚無Cx43基因表達與膠質瘤病理類型、增殖活性、生物學行為等方面的研究報道，國內則未見報道。 增殖細胞核抗原(PCNA)是近年來用以觀察細胞增殖活性的一個重要指標，它是一種細胞周期調節(jié)蛋白，其表達水平反映細胞增殖率及DNA合成率，是目前腫瘤增殖活動研究中可靠的增殖期標志物。在本實驗中，我們通過檢測Cx43mRNA及其蛋白在膠質瘤中的表達，同時用PCNA作細胞增殖指標，分析Cx

4、43基因表達與膠質瘤和增殖的關系，探討Cx43基因的表達與膠質瘤發(fā)生機制及在膠質瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，為膠質瘤惡性程度、術后的治療以及療效觀察提供客觀的依據。 方法：研究對象為手術切除且保存完好的膠質瘤組織的石蠟包埋標本47例，所有膠質瘤標本均經病理證實為原發(fā)性膠質瘤，并用10例正常腦組織標本作為對照(均取于內減壓術)。采用免疫組化及原位雜交技術檢測CX43基因的表達，SP免疫組化技術檢測增殖細胞核抗原(PCNA)的蛋白表達。

5、 結果： 1、Cx43mRNA在正常腦組織、膠質瘤組織中表達陽性率分別為100％、61.7％，實驗組和對照組之間有顯著差異(P<0.01)。低惡度膠質瘤組織(Ⅰ/Ⅱ)中Cx43表達率分別為100.0％、93.8％；高惡度膠質瘤(Ⅲ/Ⅳ)Cx43表達率分別為33.3％、16.7％，Cx43mRNA表達率與膠質瘤分級呈負相關，且低惡度腫瘤與高惡度腫瘤有顯著差異(P<0.05)。 2、Cx43蛋白在正常腦組織及不同級別膠質

6、瘤中的表達結果與Cx43mRNA相近，實驗組和對照組之間有顯著差異(P<0.01)，隨著膠質瘤組織學分級升高Cx43蛋白表達呈下降趨勢(P<0.05)，具有統計學意義。 3、PCNA在正常腦組織中均表達陰性，而在膠質瘤組織中表達陽性率為76.6％，兩組之間有顯著差異(P<0.01)。在不同級別膠質瘤中表達強弱依次為Ⅳ級100.0％、Ⅲ級94.4％、Ⅱ級62.5％和I級42.9％；PCNA表達率與膠質瘤分級呈正相關(P<0.05)

7、，且Ⅲ/IV級與Ⅰ/Ⅱ級之間有明顯差異。 4、Cx43tuRNA，Cx43蛋白，PCNA在膠質瘤組織中的表達顯示：Cx43表達結果與Cx43mRNA的表達結果之間呈顯著正相關(P<0.01)。而隨著Cx43mRNA及其蛋白表達強度逐漸下降，PCNA則呈上升趨勢，統計分析表明Cx43mRNA及其蛋白與PCNA在膠質瘤中的表達呈負相關性(P<0.05)。 結論： 1、人腦膠質瘤中Cx43 mRNA表達與膠質瘤分級呈負相關，膠

8、質瘤惡性程度越高，Cx43 mRNA表達越低或缺失。 2、人腦膠質瘤中Cx43蛋白表達與膠質瘤的分級呈負相關；與Cx43 mRNA表達水平呈正相關。隨腫瘤惡性程度增加，Cx43 mRNA轉錄水平逐漸下降，Cx43在組織中的含量降低，導致Cx43表達水平相應降低。 3、人腦膠質瘤中較正常腦組織PCNA表達明顯增高，且隨著膠質瘤組織學分級的提高，PCNA表達有升高趨勢，PCNA與膠質瘤的惡性增殖有密切聯系。 4、人腦