人腦膠質(zhì)瘤中Cx43基因表達及其與細胞增殖的關(guān)系.pdf

1、目的：顱內(nèi)腫瘤占全身腫瘤的2％，年發(fā)病率1/萬，膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤。近年來外科手術(shù)、放療、化療等綜合治療已廣泛應(yīng)用于膠質(zhì)瘤的治療，使病人在一定程度上得到暫時緩解，但復(fù)發(fā)率高、預(yù)后未能根本改善，尤其是高度惡性膠質(zhì)瘤。其原因之一就是膠質(zhì)瘤的生物學(xué)行為極為復(fù)雜，臨床神經(jīng)外科對其還缺乏足夠的認識，是目前膠質(zhì)瘤研究的難題。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展及其在腫瘤學(xué)研究中的應(yīng)用，人們已認識到腫瘤的發(fā)生是原癌基因的激活和抑癌基因的突變、失活所致。近年

2、研究表明，連接蛋白基因在許多腫瘤中表達明顯受到抑制，以Cx基因作為基本結(jié)構(gòu)和功能單位的間隙連接所介導(dǎo)的細胞間隙連接通訊(GJIC)中斷，因此，Cx基因和GJIC可能在腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。 Cx是一個多基因家族編碼的蛋白質(zhì)，目前發(fā)現(xiàn)有13個成員。鑒于Cx基因表達的組織特異性，在成人腦組織中主要表達Cx43及Cx32，其中星形細胞表達Cx43，少支膠質(zhì)細胞及某些神經(jīng)元細胞表達Cx32。有關(guān)Cx43基因在膠質(zhì)瘤中的表達，

3、目前國外僅有小宗腦膠質(zhì)瘤標本及膠質(zhì)瘤體外細胞系的研究，尚無Cx43基因表達與膠質(zhì)瘤病理類型、增殖活性、生物學(xué)行為等方面的研究報道，國內(nèi)則未見報道。 增殖細胞核抗原(PCNA)是近年來用以觀察細胞增殖活性的一個重要指標，它是一種細胞周期調(diào)節(jié)蛋白，其表達水平反映細胞增殖率及DNA合成率，是目前腫瘤增殖活動研究中可靠的增殖期標志物。在本實驗中，我們通過檢測Cx43mRNA及其蛋白在膠質(zhì)瘤中的表達，同時用PCNA作細胞增殖指標，分析Cx

4、43基因表達與膠質(zhì)瘤和增殖的關(guān)系，探討Cx43基因的表達與膠質(zhì)瘤發(fā)生機制及在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，為膠質(zhì)瘤惡性程度、術(shù)后的治療以及療效觀察提供客觀的依據(jù)。 方法：研究對象為手術(shù)切除且保存完好的膠質(zhì)瘤組織的石蠟包埋標本47例，所有膠質(zhì)瘤標本均經(jīng)病理證實為原發(fā)性膠質(zhì)瘤，并用10例正常腦組織標本作為對照(均取于內(nèi)減壓術(shù))。采用免疫組化及原位雜交技術(shù)檢測CX43基因的表達，SP免疫組化技術(shù)檢測增殖細胞核抗原(PCNA)的蛋白表達。

5、 結(jié)果： 1、Cx43mRNA在正常腦組織、膠質(zhì)瘤組織中表達陽性率分別為100％、61.7％，實驗組和對照組之間有顯著差異(P<0.01)。低惡度膠質(zhì)瘤組織(Ⅰ/Ⅱ)中Cx43表達率分別為100.0％、93.8％；高惡度膠質(zhì)瘤(Ⅲ/Ⅳ)Cx43表達率分別為33.3％、16.7％，Cx43mRNA表達率與膠質(zhì)瘤分級呈負相關(guān)，且低惡度腫瘤與高惡度腫瘤有顯著差異(P<0.05)。 2、Cx43蛋白在正常腦組織及不同級別膠質(zhì)

6、瘤中的表達結(jié)果與Cx43mRNA相近，實驗組和對照組之間有顯著差異(P<0.01)，隨著膠質(zhì)瘤組織學(xué)分級升高Cx43蛋白表達呈下降趨勢(P<0.05)，具有統(tǒng)計學(xué)意義。 3、PCNA在正常腦組織中均表達陰性，而在膠質(zhì)瘤組織中表達陽性率為76.6％，兩組之間有顯著差異(P<0.01)。在不同級別膠質(zhì)瘤中表達強弱依次為Ⅳ級100.0％、Ⅲ級94.4％、Ⅱ級62.5％和I級42.9％；PCNA表達率與膠質(zhì)瘤分級呈正相關(guān)(P<0.05)

7、，且Ⅲ/IV級與Ⅰ/Ⅱ級之間有明顯差異。 4、Cx43tuRNA，Cx43蛋白，PCNA在膠質(zhì)瘤組織中的表達顯示：Cx43表達結(jié)果與Cx43mRNA的表達結(jié)果之間呈顯著正相關(guān)(P<0.01)。而隨著Cx43mRNA及其蛋白表達強度逐漸下降，PCNA則呈上升趨勢，統(tǒng)計分析表明Cx43mRNA及其蛋白與PCNA在膠質(zhì)瘤中的表達呈負相關(guān)性(P<0.05)。 結(jié)論： 1、人腦膠質(zhì)瘤中Cx43 mRNA表達與膠質(zhì)瘤分級呈負相關(guān)，膠

8、質(zhì)瘤惡性程度越高，Cx43 mRNA表達越低或缺失。 2、人腦膠質(zhì)瘤中Cx43蛋白表達與膠質(zhì)瘤的分級呈負相關(guān)；與Cx43 mRNA表達水平呈正相關(guān)。隨腫瘤惡性程度增加，Cx43 mRNA轉(zhuǎn)錄水平逐漸下降，Cx43在組織中的含量降低，導(dǎo)致Cx43表達水平相應(yīng)降低。 3、人腦膠質(zhì)瘤中較正常腦組織PCNA表達明顯增高，且隨著膠質(zhì)瘤組織學(xué)分級的提高，PCNA表達有升高趨勢，PCNA與膠質(zhì)瘤的惡性增殖有密切聯(lián)系。 4、人腦