Ouabain對家兔心房環(huán)磷酸腺苷含量的影響.pdf

1、環(huán)磷酸腺苷（adenosine3',5'-cyclic monophosphate,cAMP）作為“第二信使”參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的多種功能，包括cAMP-依賴性的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在心臟、腎臟等多種組織中參與調(diào)節(jié)鈉泵活性。研究證實(shí)，洋地黃類物質(zhì)之一的哇吧因（ouabain）或ouabain樣強(qiáng)心苷可選擇性地與鈉泵結(jié)合并抑制其活性。在足夠劑量的條件下，ouabain抑制鈉泵介導(dǎo)的Na+轉(zhuǎn)運(yùn)，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Na+的聚集。也有些研究報(bào)道，ouabain在

2、大鼠視神經(jīng)、狗的腎皮質(zhì)、金魚的腸粘膜、小鼠胰島、鼠類上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞株以及大鼠的腦和培養(yǎng)的腎集合管細(xì)胞等不同組織細(xì)胞中可增加cAMP的含量，并參與調(diào)節(jié)鈉泵活性。然而，在心肌組織中ouabain對cAMP含量的研究甚少。在本室的前期工作中發(fā)現(xiàn)，ouabain通過抑制鈉泵對家兔心房機(jī)械活動及其內(nèi)分泌功能產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用。
　　因此，本研究假設(shè)ouabain對心房肌細(xì)胞的cAMP代謝可能產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用，并影響鈉泵活性。為了證實(shí)這一假設(shè)，利

3、用家兔離體搏動的心房灌流模型，采用放射免疫、生理學(xué)及藥理學(xué)等研究技術(shù)和“實(shí)施評價(jià)環(huán)核苷酸代謝”的實(shí)驗(yàn)方法，觀察ouabain對家兔心房肌細(xì)胞cAMP含量的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　1.處理Ouabain（3.0μmol/L）及其恢復(fù)期內(nèi)，ouabain明顯增加家兔心房的搏出量和搏動壓（與對照循環(huán)比較，均P<0.001），同時(shí)增加cAMP的逸出量（與對照循環(huán)比較P<0.01）。Ouabain的這種效應(yīng)

4、大約持續(xù)70多分鐘。
　　2.在腺苷酸環(huán)化酶激活劑forskolin（0.1μmol/L）存在下，oubain進(jìn)一步增加cAMP的含量（與對照循環(huán)比較P<0.001；與ouabain比較P<0.01）；而在磷酸二酯酶非選擇性抑制劑IBMX（0.1μmol/L）存在下，ouabain的上述效應(yīng)被消失（與IBMX比較P>0.05）。
　　3.蛋白激酶非選擇性阻斷劑staurosporine（0.3μmol/L）未能改變處理oua

5、bain時(shí)及其恢復(fù)期內(nèi)心房搏出量和搏動壓得到增加的效應(yīng)（與對照循環(huán)比較，均P<0.001）。
　　4.L-型Ca2+通道抑制劑nifedipine（1.0μmol/L）同樣不能改變處理ouabain時(shí)及其恢復(fù)期內(nèi)心房搏出量和搏動壓得到增加的效應(yīng)（與對照循環(huán)比較，均P<0.001）。同時(shí)處理staurosporine和nifedipine的結(jié)果類似于單獨(dú)處理nifedipine時(shí)的效應(yīng)。
　　5.Na+/Ca2+-交換體的抑制