乙醇對家兔腦基底動(dòng)脈影響的研究.pdf

1、研究背景:在法醫(yī)實(shí)踐中，經(jīng)常遇到蛛網(wǎng)膜下腔出血而導(dǎo)致死亡的案例，這類案件常發(fā)生在飲酒后的糾紛事件中，這就導(dǎo)致了在法醫(yī)學(xué)實(shí)際鑒定中，外力、酒精含量及疾病對蛛網(wǎng)膜下腔出血的作用往往成為一個(gè)爭論的焦點(diǎn)，其原因是我們不清楚其間的相互關(guān)系和確切的作用機(jī)制，因此提供不出一個(gè)科學(xué)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。近年來，生物力學(xué)的研究方法和手段，為我們解決這方面的問題提供了一種新的思路和方法。 目的:本研究以不同的酒精濃度，對家兔灌酒，測定血中酒精濃度，建立血液

2、乙醇濃度梯度動(dòng)物模型，測定不同乙醇濃度動(dòng)物模型局部腦微區(qū)的血流灌注量改變。在此基礎(chǔ)上測定不同酒精濃度下家兔腦基底動(dòng)脈的零壓力狀態(tài)，并用免疫組化的方法檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞HSP70的表達(dá)，以探討乙醇對腦基底動(dòng)脈的影響，從而探索運(yùn)用生物力學(xué)的方法為法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中解決諸如醉酒在蛛網(wǎng)膜下腔出血中的作用等案件提供一定的理論基礎(chǔ)。 材料與方法: 1．動(dòng)物分組及血液乙醇濃度梯度家兔動(dòng)物模型的建立 家兔40只，隨機(jī)分成4組。用酒精灌胃

3、造模，按0ml/Kg、5m1/Kg、10ml/Kg、15ml/Kg給家兔灌注56％市售食用白酒。 2．家兔灌胃后不同時(shí)間血液酒精濃度的測定 采用上海天美公司生產(chǎn)的D-7900氣相色譜儀．美國DANNl86.85頂空自動(dòng)進(jìn)樣器檢測各組家兔灌胃后30 min、60 min、75 min、90min、105min、120min血液酒精濃度。 3．家兔灌胃后不同時(shí)間測定腦血流量 采用瑞典Perimed公司生產(chǎn)的P

4、eriFlux5000激光多譜勒血流儀檢測各組家兔灌胃前及灌胃后5 min、15 min、30 min、60 min腦微區(qū)血流量情況。 4．基底動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞熱休克蛋白(HSP)70的表達(dá)情況 取灌胃2小時(shí)后家兔基底動(dòng)脈，做組織切片，用免疫組織化學(xué)的方法染色，檢測熱休克蛋白(HSP)70的表達(dá)。 5．家兔基底動(dòng)脈零應(yīng)力狀態(tài)的測定 各組家兔酒精灌胃2小時(shí)后，開顱取出家兔基底動(dòng)脈，沿血管長軸連續(xù)橫切，得到長度約

5、為1mm的血管環(huán)，然后沿血管環(huán)徑向剪開血管，靜置于kreb's液中20分鐘，用數(shù)碼相機(jī)采集得到血管零應(yīng)力狀態(tài)的數(shù)字化幾何信息。用計(jì)算機(jī)圖像分析軟件AutoCAD Electrical 2006測量基底動(dòng)脈張開角大小，以了解血管零應(yīng)力狀態(tài)的變化。 結(jié)果: 1．灌酒后血液乙醇濃度持續(xù)增高，灌胃后1.5-2h，血液乙醇濃度達(dá)到峰值；灌酒后血液乙醇濃度與灌酒量存在正相關(guān)關(guān)系； 2．家兔灌酒后局部腦微區(qū)血流量值明顯增大，至

6、30分鐘后，各組家兔腦血流量基本恒定；灌酒后局部腦微區(qū)血流量值與灌酒量存在正相關(guān)關(guān)系； 3．灌酒2小時(shí)后，家兔基底動(dòng)脈切片，做免疫組織化學(xué)染色，發(fā)現(xiàn)熱休克蛋白(HSP)70的表達(dá)，隨灌酒量的增加而增加(P<0.05)； 4．各組家兔酒精灌胃2小時(shí)后基底動(dòng)脈張開角均明顯降低，各組之間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且隨灌胃量的增大基底動(dòng)脈張開角降低越大。說明酒精濃度越大，基底動(dòng)脈零應(yīng)力狀態(tài)越低。 結(jié)論:本研究通