針灸對2型糖尿病大鼠股動脈LOX-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：糖尿病下肢血管病變作為2型糖尿病患者截肢、致殘的主要原因，其病理基礎(chǔ)是動脈粥樣硬化（AS）。既往研究發(fā)現(xiàn)，AS與脂代謝紊亂、氧化應(yīng)激等關(guān)系密切，血凝素樣低密度脂蛋白受體1（LOX-1）是當(dāng)前備受關(guān)注的AS治療靶點之一，可通過多種途徑促進(jìn)AS的發(fā)生發(fā)展。研究表明針灸對糖尿病下肢血管病變有一定防治作用，但其具體作用機制尚不明確。本研究通過高脂喂養(yǎng)、大黃灌胃聯(lián)合多次尾靜脈注射小劑量鏈脲佐菌素（STZ）的方法建立氣虛血瘀型T2DM大鼠模型

2、，針灸胰俞穴、足三里進(jìn)行干預(yù)，觀察針灸對T2DM大鼠血脂代謝（血脂四項：TG、TC、LDL-C、HDL-C）、血清SOD、MDA、Ox-LDL和股動脈LOX-1表達(dá)的影響，探索針灸胰俞穴、足三里對T2DM大鼠股動脈LOX-1表達(dá)的影響及其機制。
　　方法:38只雄性8周齡SD大鼠普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，隨機分為對照組8只，實驗組30只。對照組仍普通飼料喂養(yǎng)，實驗組高脂飼料喂養(yǎng)6周，后2周聯(lián)合大黃（0.17g/100g，QD，按10

3、倍于人的劑量）灌胃，于次日清晨稱取大鼠體重，按25mg/kg尾靜脈注射STZ，對照組注射等量生理鹽水，一周后割尾法取血測血糖，實驗組隨機血糖大于16.7mmol/L為T2DM造模成功，血糖不達(dá)標(biāo)者按25mg/kg第二次尾靜脈注射STZ。實驗組所有成模大鼠按血糖水平、體重大小隨機區(qū)組分組分為模型組和針灸組。針灸組取“胰俞穴”和“足三里”，用英迪KWD-808 I型脈沖電針治療儀進(jìn)行電針刺激，電流1mA,頻率2Hz，同時艾灸足三里，每次10

4、min，每日1次，共干預(yù)4周。期間模型組和針灸組繼續(xù)高脂飲食喂養(yǎng)4周。所有大鼠處死前一天禁食，麻醉后腹主動脈取血測定血脂四項（TG、TC、LDL-C、HDL-C）、血清SOD、MDA和Ox-LDL，取大鼠股動脈冰凍切片HE染色觀察組織病理形態(tài)變化、免疫組化測定LOX-1表達(dá)，取大鼠股動脈組織Western Blot測定LOX-1蛋白表達(dá)量。所得數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件分析。
　　結(jié)果：
　　1、高脂飼料喂養(yǎng)6周加多次尾

5、靜脈注射小劑量STZ（25mg/Kg）誘導(dǎo)2型糖尿病的成功率為96.67％。
　　2、模型組和針灸組大鼠血清TC、TG、LDL-C顯著高于對照組（P＜0.05），與模型組比較，針灸組大鼠血清TC、TG、LDL-C顯著降低(P＜0.05)，但模型組、針灸組和正常組血清HDL-C無顯著差異(P＞0.05)。
　　3、與對照組比較，模型組大鼠Ox-LDL和MDA的表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，與模型組比較，針灸組大鼠Ox-LDL和

6、MDA的表達(dá)顯著降低(P＜0.05)。與對照組比較，模型組和針灸組大鼠SOD表達(dá)顯著降低(P＜0.05)，與模型組比較，針灸組大鼠SOD表達(dá)顯著升高(P＜0.05)。
　　4、模型組大鼠股動脈出現(xiàn)早期血管病變，正常組和針灸組幾乎無病變。
　　5、與對照組比較，模型組LOX-1蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05），與模型組比較針灸組的LOX-1蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、高脂飲食加多次尾靜脈

7、注射小劑量STZ（25mg/Kg）可成功誘導(dǎo)SD大鼠T2DM模型，方法簡單，成模率高；
　　2、LOX-1在T2DM大鼠下肢血管病變早期表達(dá)水平增高，可能與脂代謝紊亂和MDA、Ox-LDL升高，SOD降低有關(guān)；
　　3、針灸可以降低 T2DM大鼠下肢血管 LOX-1的表達(dá)，其機制可能與針灸能調(diào)節(jié)脂代謝紊亂，降低MDA、Ox-LDL表達(dá)、升高SOD表達(dá)有關(guān)。
　　4、針灸可通過降低血管LOX-1、MDA、Ox-LDL表達(dá)