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文檔簡介
1、目的:分析SD大鼠消化道不同部位乳酸桿菌的多樣性
方法:3只6周齡正常SD大鼠普通飼料喂養(yǎng)4周后,分別取喂養(yǎng)飼料、胃、小腸近端、小腸遠端、大腸的粘液和內(nèi)容物,提取細菌DNA,采用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法分析SD大鼠各個部位乳酸桿菌的多樣性。
結果:
(1)用乳酸桿菌屬通用引物LactoF/R對普通飼料及大鼠四個部位提取的細菌DNA進行PCR擴增,擴增后電泳顯示,普通飼料沒
2、有條帶,其余標本均有條帶。
(2)胃部三個16S rDNA部分可變區(qū)域基因文庫中均得到9個相同的操作分類單元(Operational Taxonomic Unit,OTU,基因序列相似性大于98%),其中6個OTU屬于可培養(yǎng)的乳酸桿菌屬菌株,另外三個屬于不可培養(yǎng)的細菌克隆子。
(3)小腸近端三個16S rDNA部分可變區(qū)域基因文庫文庫中分別得到了10,9,10個OTU,樣本1和樣本3的10個OTU相同,樣本2比樣本1
3、和3少了Uncultured Lactobacillus sp.cloneBR15AD06。
(4)小腸遠端三個16S rDNA部分可變區(qū)域基因文庫中分別得到了13,12,13個OTU,樣本1和樣本3的13個OTU相同,樣本2比樣本1和3少了Lactobacillus johnsonii CRL1452。
(5)大腸三個16S rDNA部分可變區(qū)域基因文庫中分別得到了10,11,9個OTU,其中樣本1少了Uncult
4、ured bacterium clone PF4980,樣本3中少了Uncultured bacterium clone ECN343e07和Lactobacillusintestinalis TH4。
結論:
(1) SD大鼠胃部、小腸近端、小腸遠端、大腸四個部位的內(nèi)容物及粘液均可檢測到乳酸桿菌。
(2)小腸遠端乳酸桿菌菌種多樣性最高,而小腸近端的乳酸桿菌均勻度最高,胃部乳酸桿菌多樣性和均勻度均低于其他檢
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