利用cDNA-AFLP分析甘蔗與黑穗病菌互作后的基因差異表達(dá).pdf

1、甘蔗黑穗病是由黑粉菌引起的一種最主要的甘蔗真菌性病害，嚴(yán)重影響蔗莖產(chǎn)量和質(zhì)量。抗黑穗病育種一直是甘蔗育種的重要目標(biāo)和當(dāng)前生產(chǎn)上急需解決的關(guān)鍵問(wèn)題。為此，本研究以甘蔗高抗黑穗病品種NCo376為試驗(yàn)材料，利用cDNA-AFLP和銀染技術(shù)，研究了黑穗病菌優(yōu)勢(shì)小種2脅迫下甘蔗基因的差異表達(dá)，獲得了136個(gè)差異表達(dá)片段，從中挑取40個(gè)差異片段，經(jīng)過(guò)克隆、測(cè)序和RT-PCR標(biāo)記驗(yàn)證后，篩選到37個(gè)誘導(dǎo)后差異表達(dá)的片段，其中31條為特異表達(dá)(誘導(dǎo)或

2、缺失)片段，6條為表達(dá)量差異(上調(diào)或下調(diào))的片段。在NCBI上進(jìn)行blastx同源性分析顯示，34條差異表達(dá)基因序列可能在甘蔗與黑穗病菌互作響應(yīng)中起作用，其功能涉及細(xì)胞拯救與防御、細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸、新陳代謝、核酸代謝、轉(zhuǎn)錄、蛋白合成與修飾及信號(hào)傳導(dǎo)等生物學(xué)過(guò)程；其余2條差異表達(dá)序列與玉米mRNA序列同源性高，達(dá)86％和80％，1條與甘蔗葉綠體DNA序列同源性高，達(dá)96％。此外，為了驗(yàn)證差異表達(dá)基因的真實(shí)性，研究還選取其中3個(gè)差異表達(dá)基因(SU