雜交鱘體表潰瘍病的病原學(xué)及組織病理學(xué)研究.pdf

1、經(jīng)常規(guī)細(xì)菌分離，從自然發(fā)生體表潰瘍病的雜交鱘中分離到一株病原菌K070401。該菌株在TSA平板上生長(zhǎng)呈1.5-2mm大小，邊緣光滑，中央凸起，半透明的菌落。顯微鏡下見(jiàn)革蘭氏陰性短桿菌，兩頭鈍圓，大多數(shù)細(xì)菌單獨(dú)存在，少數(shù)細(xì)菌成對(duì)甚至成鏈存在。該菌葡萄糖氧化發(fā)酵陽(yáng)性，氧化酶檢測(cè)陽(yáng)性，0％NaCI生長(zhǎng)，脂酶陽(yáng)性。能利用甘露醇具運(yùn)動(dòng)性，能發(fā)酵麥芽糖，不產(chǎn)生H2S，葡萄糖產(chǎn)酸陽(yáng)性，葡萄糖產(chǎn)氣陽(yáng)性，精氨酸雙水解酶陽(yáng)性，DNA酶陽(yáng)性，鳥(niǎo)氨酸脫羧陰性

2、，還原硝酸鹽。對(duì)羅美沙星，磺胺異嗯唑，氯霉素，阿奇霉素敏感，對(duì)克拉霉素，強(qiáng)力霉素，鏈霉素，美滿霉素較敏感，對(duì)氨芐青霉素，萬(wàn)古霉素，阿莫西林不敏感。應(yīng)用細(xì)菌通用PCR引物，擴(kuò)增出K070401菌株的16SrDNA的互補(bǔ)DNA片段，該片段大小為1473bp。將獲得的序列在RDP數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行在線Classifer。結(jié)果表明，該菌屬于氣單胞菌屬的細(xì)菌，再將獲得的序列與GenBank中已報(bào)道的的嗜水氣單胞菌16SrDNA序列用DNAstar軟件進(jìn)行

3、多序列比對(duì)分析和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。結(jié)果證實(shí)，K070401分離株與其他嗜水氣單胞菌形成一個(gè)簇群，同源性高達(dá)為99.2％以上，故確定該菌為嗜水氣單胞菌。同時(shí)，通過(guò)肌肉注射、劃痕浸泡和浸泡試驗(yàn)檢測(cè)該菌對(duì)雜交鱘的毒力，結(jié)果表明，前兩種方式出現(xiàn)與自然發(fā)病魚(yú)相似的體表潰瘍癥狀，并引起死亡，病灶處骨骼肌間質(zhì)水腫，間隙增寬，間質(zhì)中有大量紅細(xì)胞及嗜中性白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、和單核細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；肌纖維變性，肌漿凝固，嗜酸性增強(qiáng)，呈嚴(yán)重紅染。有的肌纖維出現(xiàn)