Hes1與Akt-Stat3相互整合在缺血后適應中的心肌保護作用.pdf

1、目的:明確Hes1在心肌缺血后適應中的保護作用,探討其內源性心肌保護作用的分子機制。
　　方法:構建 Hes1基因表達(Ad-Hes1)和干擾(Ad-Hes1-shRNA)重組腺病毒載體, Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌細胞原代培養(yǎng),分別感染Ad-Hes1及Ad-Hes1-shRNA,建立心肌缺血/再灌注(H/R)、缺血后適應模型(IPost)體外模型,按實驗分為六組:對照組(Control)、空載組(Mock)、缺

2、血再灌注組(H/R)、缺血再灌注Hes1表達組(H/R+Hes1)、缺血后適應組(IPost)、缺血后適應Hes1干擾組(IPost+Hes1-shRNA)。檢測各組細胞活力、凋亡、活性氧及線粒體膜電位,Western blottingting檢測Hes1、PTEN、Akt/p-Akt、Stat3/p-Stat3、GSK-3β/p-GSK-3β。
　　結果:心肌細胞缺氧性損傷時,Hes1表達顯著增高。Hes1的表達增高后可顯著提高

3、H/R組細胞的活力,穩(wěn)定細胞線粒體膜電位,抑制胞質內的ROS生成,下調PTEN的表達,上調p-Akt、p-GSK-3β、p-Stat3表達,增強心肌的保護作用;抑制Hes1表達后,p-Akt、p-GSK-3β、p-Stat3表達量顯著降低,而IPost對心肌細胞的保護作用也隨之下降。
　　結論:Hes1作為內源性心肌保護因子,通過激活PI3K/Akt和JAK/Stat3信號通路,減少細胞內ROS生成,抑制線粒體通透性轉換孔開放,減