WDR26在心肌缺血后適應(yīng)中的表達(dá)與作用.pdf

1、研究目的:研究Post-con是否也能誘導(dǎo)WDR26表達(dá)，以及WDR26在Post-con的心肌保護(hù)效應(yīng)中有何功能。
　　 研究方法:1:在整體水平采用結(jié)扎冠狀動脈左前降支(LAD)制備大鼠心肌缺血/再灌注損傷動物模型，通過計算心肌梗死面積以及心肌酶學(xué)測定來評估模型的成功與否，并以此判斷Post-con對I/R損傷的保護(hù)作用，同時采用熒光定量PCR和免疫印跡技術(shù)分別從轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平檢測Post-con對WDR26表達(dá)的影響。2

2、:在細(xì)胞水平采用培養(yǎng)的H9c2細(xì)胞構(gòu)建缺氧/復(fù)氧細(xì)胞模型，通過檢測乳酸脫氫酶釋放來評估Post-con對缺氧/復(fù)氧所致細(xì)胞損傷的影響，并從轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平檢測Post-con對心肌細(xì)胞中WDR26表達(dá)的影響。3:構(gòu)建WDR26過表達(dá)H9c2細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)(floweytometry，F(xiàn)CM)、Hoechst/PI染色觀察WDR26過表達(dá)對缺氧/復(fù)氧所致細(xì)胞凋亡的影響。
　　 實驗結(jié)果:①大鼠進(jìn)行心肌Post-con后，TT

3、C染色示心肌梗死面積顯著減小(P<0.05VSI/R組)，心肌酶學(xué)檢測示心肌酶(LDH，CK)釋放減少(P<0.05VSI/R組)。②Real-timequantitativeRT-PCR和Westernblot檢測發(fā)現(xiàn)，WDR26mRNA及WDR26蛋白在Post-con中表達(dá)增高(P<0.05VSI/R組)。③Post-con顯著抑制缺氧/復(fù)氧所致H9c2細(xì)胞的LDH釋放以及誘導(dǎo)WDR26mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)。④流式細(xì)胞術(shù)和Hoec