磷脂與β-淀粉樣蛋白多肽(Aβ42)的相互作用研究及藥物篩選.pdf

1、阿爾茨海默病又稱老年癡呆癥,是在老年人中發(fā)病率極高的一種神經(jīng)退行性疾病。研究表明:β-淀粉樣蛋白多肽分子的異常聚集以及磷脂與β-淀粉樣蛋白多肽分子的相互作用可能是導(dǎo)致阿爾茨海默病的主要因?yàn)橹?。本論文的主要工作?
　　 (1)采用原子力顯微鏡(AFM)、硫代磺色素(ThT)熒光探針和紫外可見(jiàn)-吸收光譜法分別研究了pH值分別為3.5、5.2、8.0下,濃度為2μmol·L-1的Aβ42與磷脂間的相互作用。通過(guò)構(gòu)筑一個(gè)和人體大腦環(huán)

2、境近似的體系,以磷脂雙層支撐膜來(lái)模擬腦細(xì)胞的細(xì)胞膜,采用AFM現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)Aβ42在磷脂膜誘導(dǎo)下的聚集行為。AFM結(jié)果表明:低濃度的Aβ42的自聚集速度要比相應(yīng)環(huán)境的磷脂作用下的Aβ42的聚集速度慢,聚集程度小。磷脂作用下的Aβ42,在溶液環(huán)境pH為3.5時(shí),Aβ42聚集的速度比較快,而且主要聚集為纖維狀；pH為5.2時(shí),Aβ42聚集速度最慢,且主要聚集成球狀的寡聚體；pH為8.0時(shí),Aβ42的聚集速度介于3.5與5.2之間,主要聚集狀態(tài)為

3、2-3 nm高的纖維細(xì)絲。支撐雙層磷脂膜可以誘導(dǎo)Aβ42的聚集；紫外.可見(jiàn)吸收光譜驗(yàn)證了AFM的結(jié)果；ThT熒光探針?lè)ńY(jié)果表明:隨著孵化時(shí)間的延長(zhǎng),磷脂囊泡作用下的Aβ42的熒光強(qiáng)度比單獨(dú)的Aβ42的熒光要弱,即磷脂囊泡可以抑制Aβ42的聚集。
　　 (2)以二茂鐵寡肽分子Fc-KLVFFK6為信標(biāo),分別利用AFM現(xiàn)場(chǎng)觀測(cè)和電化學(xué)方法研究了潛在藥物對(duì)Aβ42聚集物的影響作用。相關(guān)研究表明:Aβ42的球形寡聚體可以對(duì)生物膜造成不可

4、恢復(fù)的破壞,而Aβ42纖維對(duì)膜的損害隨著纖維的移除可以恢復(fù),這說(shuō)明Aβ42寡聚體對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的毒性大于Aβ42纖維對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的毒性。本論文分別利用AFM和電化學(xué)方法,以神經(jīng)退行性疾病之一的阿爾海默病為例,建立了一種篩選治療神經(jīng)退行性疾病藥物的方法。AFM結(jié)果顯示:我們選擇的藥物能夠選擇性的消除細(xì)胞毒性比較大的Aβ42寡聚體從而阻斷其纖維化。電化學(xué)數(shù)據(jù)顯示:Fc-KLVFFK6分子信標(biāo)與Aβ42的混合溶液,隨著孵化時(shí)間的延長(zhǎng),Fc-KLV