腸淋巴再灌注加重SMAO休克大鼠脾損傷的作用與機(jī)制.pdf

1、背景：腸系膜上動(dòng)脈閉塞性(superior mesenteric artery occlusion， SMAO)休克是由多種原因引起腸系膜上動(dòng)脈閉塞導(dǎo)致腸道缺血、恢復(fù)血液再灌注后出現(xiàn)的嚴(yán)重病理過程。研究發(fā)現(xiàn)，腸淋巴再灌注(mesenteric lymph reperfusion， MLR)可加劇SMAO休克大鼠肝、腎、心、肺等重要器官的功能障礙、組織形態(tài)學(xué)損傷、自由基損傷以及炎癥反應(yīng)。由于免疫功能紊亂是炎癥反應(yīng)失衡的重要因素。而脾臟作為

2、機(jī)體最重要的免疫器官，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。那么，脾臟在MLR加重SMAO器官炎癥反應(yīng)的過程中有何變化，發(fā)揮怎樣的作用？值得研究。
　　 目的：本研究觀察MLR對SMAO休克大鼠脾組織形態(tài)學(xué)的影響，同時(shí)，從氧自由基、一氧化氮、中性粒細(xì)胞、膜泵等方面揭示其作用機(jī)制，探討MLR加重SMAO休克中脾損傷的作用意義，為SMAO休克器官損傷的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：24只Wistar雄性大鼠，隨機(jī)分為4組：SMA

3、O組，夾閉腸系膜上動(dòng)脈(superior mesenteric artery, SMA)1h，再灌注2h; MLR組，夾閉腸系膜淋巴管(mesenteric lymphatic duct，MLD)1h，再灌注2h;SMAO+MLR組，同時(shí)夾閉MLD和SMA1h，再灌注2h;假手術(shù)組（Sham組），僅麻醉和手術(shù)。于再灌注2h后，選擇固定位置留取脾組織，部分用于制備病理切片，觀察形態(tài)學(xué)變化；部分用于制備脾組織勻漿，檢測自由基損傷指標(biāo)：包括丙

4、二醛(malondialdehyde， MDA)含量與超氧化物歧化酶(superoxide dismutase， SOD)活性；一氧化氮(nitric oxide， NO)含量及其合酶(nitric oxide synthase， NOS)活性；反映中性粒細(xì)胞黏附與扣押的指標(biāo)：包括細(xì)胞間黏附分子(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)含量與髓過氧化物酶(myeloperoxidase， MPO

5、)活性；炎癥介質(zhì)腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)以及細(xì)胞膜泵(ATPase)活性指標(biāo)。
　　 結(jié)果：形態(tài)學(xué)觀察顯示，Sham組與MLR組大鼠脾組織結(jié)構(gòu)基本正常；SMAO組大鼠脾組織可見大量淤血，MLR+SMAO組大鼠脾組織除大量淤血外，還可見細(xì)胞腫脹、排列紊亂。Sham組與MLR組脾勻漿所有指標(biāo)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。SMAO組、MLR+SMAO組大鼠脾勻漿MDA、NO、ICAM-1、TNF-α

6、含量與NOS、MPO活性均顯著高于Sham組與MLR組，且MLR+SMAO組MDA、ICAM-1、TNF-α含量與NOS、MPO活性高于SMAO組：SMAO組、MLR+SMAO組大鼠脾勻漿SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性均顯著低于Sham組與MLR組，且MLR+SMAO組SOD、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase活性低于SMAO組：MLR

7、+SMAO組脾勻漿NO含量與Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性與SMAO組無顯著差異。
　　 結(jié)論：MLR加重了SMAO休克大鼠脾組織的損傷，其作用機(jī)制一方面與加重脾組織自由基損傷、增強(qiáng)一氧化氮合酶活性、降低細(xì)胞膜泵功能等因素有關(guān)；另一方面也與增加ICAM-1、引起多形核中性白細(xì)胞(polymorphonuclear neutrophils， PMN)黏附、扣押于脾組織從而加重炎癥反應(yīng)有關(guān)。研究結(jié)果