大鼠腦損傷后海馬糖皮質激素受體變化對認知功能的影響.pdf

1、目的：采用實驗動物顱腦損傷裝置制作外傷性腦損傷（traumaticbraininjury,TBI）的動物模型，研究外傷性腦損傷后大鼠海馬區(qū)糖皮質激素受體（glucocorticoidreceptor,GR）表達變化及其對認知功能的影響，以期待為臨床腦保護治療提供一定的實驗依據。
　　方法：健康Stragu-Dawley（SD）大鼠，清潔級，雄性，體重200～250g。將120只大鼠完全隨機化分組：對照組（24只），損傷組（96只）

2、，將損傷組分別劃分為傷后4d，5d，6d，7d，共4個時相每組24只。運用實驗動物顱腦損傷裝置進行腦外傷動物模型的制作；并按規(guī)定時間處死大鼠,取海馬組織，分別進行免疫組織化學、蛋白免疫印跡（westernblotting）、反轉錄聚合酶鏈式反應(reversetranscription-PCR,RT-PCR)三種方法檢測海馬區(qū)GR在各個時相的表達變化情況。另取16只大鼠完全隨機化分組：對照組和損傷組，每組各8只。根據Morris水迷宮測

3、定方法，本實驗于損傷后4d始行第一次Morris水迷宮實驗，4/d，連續(xù)4d，隨機從四個象限(N、S、E、W)任一個象限將大鼠面向池壁放入水中，如果大鼠在120s內未找到平臺，由實驗者將其引至平臺，并使大鼠在平臺上停留15s，以便大鼠對平臺的記憶，逃避潛伏期記為120s。每次訓練完成后，迅速用干毛巾將大鼠擦干，并放置于加熱器旁，以防大鼠體溫過低。記錄大鼠尋找并爬上平臺所需時間即逃避潛伏期，記錄小鼠找到平臺的時間（逃避潛伏期）。在最后一日

4、去除平臺再進行空間探索實驗，將大鼠從離原平臺最遠的象限面向池壁放入水中，記錄大鼠在30s內在原有平臺象限內穿越平臺的次數。通過Morris水迷宮實驗測試大鼠學習記憶功能的變化并結合傷后各組在相同時間點海馬區(qū)GR表達變化，去探討GR對大鼠海馬創(chuàng)傷后認知功能的影響及其機制。實驗中所得數據均以x±S表示，應用SPSS14.0軟件進行各組之間ANOVA法進行方差分析和配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。
　　結果：大鼠腦損傷后各時

5、相海馬CA1區(qū)存在廣泛的神經元變性壞死，并且隨時間的推移病理現象呈現緩解趨勢。而海馬區(qū)GR表達也呈現相應的變化趨勢即傷后海馬區(qū)GR的表達呈下調趨勢。在傷后6d表達量最低，隨后開始恢復，但各個時相損傷組的GR表達均低于對照組。水迷宮實驗結果顯示:大鼠腦創(chuàng)傷后存在顯著的空間認知功能障礙，在傷后6d檢測尋找平臺潛伏期明顯長于對照組的潛伏期。
　　結論：實驗動物顱腦損傷裝置制作出理想的大鼠彌漫性軸索損傷模型。大鼠腦損傷后，海馬區(qū)神經元存在