PKCδ對高葡萄糖刺激的HK-2細胞p66Shc磷酸化及線粒體轉(zhuǎn)位的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　觀察高葡萄糖刺激下人腎小管上皮細胞（HK-2）中PKCδ和p66Shc的mRNA表達及蛋白磷酸化水平。研究PKCδ對高葡萄糖刺激下HK-2細胞p66Shc磷酸化及線粒體轉(zhuǎn)位的影響。
　　方法：
　　1、以HK-2細胞作為體外觀察的細胞，采用不同濃度和同一濃度不同時間葡萄糖刺激HK-2細胞，分別用Real Time PCR和Western Blot技術(shù)，檢測PKCδ和p66shc基因及蛋白磷酸化水平。

2、　　2、①用PKCδ抑制劑對HK-2細胞進行干預，用或不用高葡萄糖處理后，采用Western blot和細胞免疫熒光技術(shù)分析p66Shc蛋白磷酸化水平;②經(jīng)上述方法處理細胞后，分別提取細胞漿與線粒體蛋白，用Western blot觀察磷酸化p66Shc蛋白線粒體轉(zhuǎn)位情況。
　　結(jié)果：
　　1、高葡萄糖刺激下PKCδ和p66Shc的mRNA表達及蛋白磷酸化水平較對照組明顯增加(P＜0.05)，且呈劑量和時間依賴。
　　2

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