β-Catenin酪氨酸磷酸化對其核轉(zhuǎn)位及Ki-67轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響.pdf

1、目的：探討β-Catenin酪氨酸磷酸化對Ki-67轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響。
　　方法：用Western Blot檢測細(xì)胞中β-Catenin的表達(dá)及genistein作用后細(xì)胞核中β-Catenin表達(dá)及genistein作用后細(xì)胞中酪氨酸磷酸化的β-Catenin的水平；用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測genistein作用后、轉(zhuǎn)入β-Catenin小干擾后及其轉(zhuǎn)入β-Catenin質(zhì)粒后，Ki-67基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性的變化；用免疫細(xì)胞化學(xué)檢

2、測genistein作用后細(xì)胞中Ki-67的表達(dá)水平；用Annexin V-PI檢測genistein作用后對細(xì)胞凋亡的影響。
　　結(jié)果：β-Catenin在正常細(xì)胞中的表達(dá)水平比在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)高；而腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核中β-Catenin的表達(dá)水平比腫瘤細(xì)胞細(xì)胞漿中β-Catenin的表達(dá)水平高，正常細(xì)胞細(xì)胞漿中β-Catenin的表達(dá)水平比正常細(xì)胞細(xì)胞核中β-Catenin的表達(dá)水平高；genistein作用后Ki-67核心啟動

3、子的轉(zhuǎn)錄活性下降；genistein作用后腫瘤細(xì)胞核中β-Catenin表達(dá)水平下降而正常細(xì)胞中β-Catenin無顯著的變化；genistein作用后腫瘤細(xì)胞中酪氨酸磷酸化的β-Catenin水平顯著下降，而正常細(xì)胞中沒有明顯變化；genistein作用后促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞凋亡，而對正常細(xì)胞促凋亡作用不顯著；轉(zhuǎn)染β-Catenin siRNA細(xì)胞中Ki-67核心啟動子的轉(zhuǎn)錄活性增加；轉(zhuǎn)染β-Catenin質(zhì)粒的細(xì)胞中Ki-67核心啟動子的