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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:以昆侖雪菊為研究對(duì)象,從昆侖雪菊提取物中篩選α-葡萄糖苷酶抑制劑。采用HepG2細(xì)胞株建立胰島素抵抗細(xì)胞模型,研究昆侖雪菊提取物對(duì)胰島素抵抗的改善作用,為防治2型糖尿病藥物的開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:采用α-葡萄糖苷酶活性體外測(cè)定方法,篩選昆侖雪菊提取物中具有抑制α-葡萄糖苷酶的有效成分。用高濃度的胰島素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞建立胰島素抵抗細(xì)胞模型;用四甲基偶氮唑鹽(MTT)方法檢測(cè)昆侖雪菊提取物對(duì)HepG2細(xì)胞活力的影
2、響;用葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶(GOD-POD)法檢測(cè)HepG2細(xì)胞和胰島素抵抗的HepG2細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取能力,以判斷抗性細(xì)胞模型的形成。在此基礎(chǔ)上,用昆侖雪菊提取物干預(yù)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞模型,觀察其對(duì)葡萄糖消耗的影響。
結(jié)果:昆侖雪菊的5種提取物均具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中昆侖雪菊提取物Ⅰ對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性最高。在低糖(葡萄糖含量為5.55mmol/L)無(wú)血清培養(yǎng)基中,昆侖雪菊提取物Ⅰ和Ⅳ的0
3、.01g/L,0.02g/L,0.05g/L3個(gè)劑量組對(duì)HepG2細(xì)胞的活力均無(wú)影響;昆侖雪菊提取物Ⅰ(0.01g/L,0.02g/L)可促進(jìn)HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗,最佳濃度為0.01g/L。昆侖雪菊提取物Ⅰ(0.01g/L)能夠促進(jìn)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗,增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)胰島素的敏感性,并且能夠?qū)垢咭葝u素誘導(dǎo)的胰島素抵抗效應(yīng)。
結(jié)論:昆侖雪菊提取物Ⅰ可促進(jìn)HepG2細(xì)胞和胰島素抵抗的HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗
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