糖尿病肝損傷防治的初步研究.pdf

1、糖尿病己成為影響人們生活質(zhì)量的一種重要疾病，我國糖尿病患者的總?cè)藬?shù)居世界前列，肝臟在糖尿病發(fā)生的病理生理過程中占重要位置，因此，糖尿病患者的肝損傷應(yīng)該引起足夠的重視。
　　 谷胱甘肽(GSH)，具有較強(qiáng)的抗氧化作用，臨床上已初步用于糖尿病神經(jīng)病變、糖尿病脂肪肝等的防治，但GSH在防治糖尿病肝損傷的機(jī)制尚不清楚。積雪草酸(AA)具有多方面的藥理作用：抗氧化、抗炎、神經(jīng)保護(hù)和抑制腫瘤細(xì)胞增殖等，但積雪草酸用于糖尿病及其并發(fā)癥尚未見報(bào)

2、道。
　　 目的：分析鎮(zhèn)江某醫(yī)院糖尿病患者的臨床數(shù)據(jù)，了解糖尿病肝損傷的發(fā)生率、病理及臨床特點(diǎn)。探討內(nèi)源性抗氧化劑GSH和天然化合物AA對(duì)STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病大鼠肝損傷的防治作用及可能機(jī)制。
　　 方法：統(tǒng)計(jì)臨床糖尿病患者的資料：①一般資料：性別、年齡、糖尿病病程、臨床表現(xiàn)、糖尿病并發(fā)癥診斷結(jié)果。②人體學(xué)指標(biāo)：身高、體重。③生化指標(biāo)：空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密

3、度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL-C)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(BIL)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)和堿性磷酸酶(ALP)。④肝臟B超。分析糖尿病患者糖尿病肝損傷的發(fā)病機(jī)制、臨床病理特點(diǎn)。
　　 設(shè)置對(duì)照組(NC)，另用65 mg·kg-1鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，成模后將其分為糖尿病(DM)組，DM+GSH組。灌胃給藥8周后分離血清、肝臟，檢測(cè)血清TG、TC、HDL-

4、C、LDL、ALT、AST、TBIL、直接膽紅素(DBIL)水平，分析血清和肝臟組織的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量或活力，檢測(cè)各組大鼠肝臟線粒體對(duì)腫脹模型的敏感性和線粒體膜電位(△Ψm)，HE染色觀察肝臟組織形態(tài)。免疫組化分析線粒體外膜蛋白VDAC的表達(dá)。
　　 體外fenton反應(yīng)研究AA清除羥自由基的能力，MTT法研究其對(duì)正常肝細(xì)胞和肝腫瘤細(xì)胞增殖的影響，建立CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型，從血清的ALT

5、、AST活力和肝組織的MDA、GSH含量比較等方面檢測(cè)其保肝作用。建立糖尿病大鼠模型，設(shè)置對(duì)照組(control)，DM組，低、中、高劑量(10 mg·kg-1、20 mg·kg-1、40 mg·kg-1)AA干預(yù)組，20 mg·kg-1硫辛酸(LA)陽性對(duì)照組。灌胃給藥8周后分離血清、肝臟，檢測(cè)指標(biāo)與GSH干預(yù)DM大鼠的研究相同。此外，研究了AA對(duì)糖尿病大鼠肝線粒體的影響。
　　 結(jié)果：經(jīng)篩選選取糖尿病患者274例，1型糖尿病

6、31例，2型243例。絕大部分患者表現(xiàn)有典型糖尿病癥狀。B超檢查發(fā)現(xiàn)2型糖尿病患者中檢出肝功異常者96例，占40％，主要為脂肪肝。1型糖尿病患者肝功指標(biāo)紊亂較少，僅3％～26％。2型糖尿病患者肝功異常比例占糖尿病患者總數(shù)的10％-30％，其中GGT異常所占比例最高。1型糖尿病患者血脂異常比例約為10％。2型糖尿病患者LDL-C、TG、TC異常比例占糖尿病患者總數(shù)的14.81％、40.33％、17.7％，其中女性患者血脂紊亂程度稍高。同時(shí)

7、，伴有肝損傷患者血漿TG、TC紊亂程度顯著高于肝正?；颊?。糖尿病超重和肥胖患者易并發(fā)肝損傷，肝損傷患者與肝正?；颊叩捏w重分布相比有顯著性差異。
　　 DM大鼠空腹血糖、LDL-C、TC、TG含量較正常組有顯著升高，血清ALT、AST、BIL、LDH水平升高，血清和肝臟的SOD活力下降、MDA含量升高，肝臟線粒體膜電位下降、對(duì)Ca2+誘導(dǎo)的腫脹敏感度下降。HE染色發(fā)現(xiàn)糖尿病大鼠肝細(xì)胞增大、出現(xiàn)空泡等病理情況。免疫組化顯示，肝線粒體

8、外膜VDAC蛋白表達(dá)量降低。GSH能夠顯著抑制以上各項(xiàng)指標(biāo)的變化。
　　 200、500、1000μmol·L-1 AA具有清除羥自由基的活性，呈劑量依賴性。20、30、40μmol·L-1的AA抑制HepG2細(xì)胞增殖，改變細(xì)胞形態(tài)，1、10 nmol·L-1的AA改善300μmol·L-1H2O2誘導(dǎo)的WRL-68細(xì)胞損傷。CCl4急性肝損傷小鼠血清ALT、AST水平升高，肝臟MDA含量升高，線粒體受到損傷，AA能夠顯著降低A

9、LT、AST、MDA等的升高。糖尿病大鼠肝功指標(biāo)紊亂，AA能夠一定程度上抑制各項(xiàng)指標(biāo)的變化。
　　 結(jié)論：臨床資料表明糖尿病肝損傷比例約為30％。B超檢查是臨床肝功檢測(cè)的有效手段之一，肝功指標(biāo)以GGT、ALT升高最為敏感，血脂指標(biāo)以TG、TC紊亂最為突出，且與肥胖相關(guān)。
　　 GSH對(duì)糖尿病大鼠肝臟損傷具有明顯的改善作用，其作用可能與調(diào)節(jié)血脂代謝、調(diào)節(jié)肝臟氧化還原平衡、保護(hù)肝臟線粒體以及影響VDAC表達(dá)有關(guān)。