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文檔簡介
1、目的:通過建立大鼠酒精性肝炎的動(dòng)物模型,來探討5-脂加氧酶(5-LOX)在大鼠酒精性肝炎(AH)肝臟組織中的表達(dá)及意義,闡明5-LOX抑制劑、COX-2抑制劑、以及兩種抑制劑聯(lián)合治療對(duì)大鼠酒精性肝炎防治的影響。
方法:(1)42只體重在180-210g的雄性SPF級(jí)SD大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(8只)、模型組(8只)、COX-2抑制劑組(9只)、5-LOX抑制劑組(9只)、COX-2和5-LOX聯(lián)合抑制組(8只)。除正常對(duì)照組
2、給予生理鹽水灌胃外,其它實(shí)驗(yàn)組分別給予55°白酒灌胃11周建立大鼠酒精性肝炎的動(dòng)物模型。造模成功后,COX-2抑制劑組給予塞萊昔布灌胃治療2周,5-LOX抑制劑組給予齊留通灌胃治療2周,聯(lián)合抑制組給予上述兩種抑制劑灌胃治療2周,同時(shí)模型組給予等量生理鹽水灌胃2周。2周后抽血、取出肝組織行相應(yīng)的檢查。(2)全自動(dòng)生化分析儀檢測各組大鼠血清ALT和AST的水平。(3)病理組織切片HE染色觀察并評(píng)估各組大鼠的肝臟炎癥程度。(4)Western
3、 blot、Real timePCR分別檢測各組大鼠肝臟組織中5-LOX、COX-2、TNF-α的蛋白及mRNA的表達(dá)水平。
結(jié)果:(1)成功建立了大鼠酒精性肝炎的動(dòng)物模型,模型組大鼠肝臟病理染色發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞壞死明顯,大量炎性細(xì)胞浸潤,部分大鼠肝小葉內(nèi)可見脂滴空泡形成;COX-2抑制劑組、5-LOX抑制劑組、聯(lián)合抑制劑組的組織病理損傷較模型組均有所減輕,尤以聯(lián)合抑制劑組減輕明顯。(2)模型組大鼠血清ALT、AST水平明顯高于正常
4、組;COX-2抑制劑組、5-LOX抑制劑組、聯(lián)合抑制劑組的ALT、AST水平均低于模型組;聯(lián)合抑制劑組的AST水平分別低于COX-2抑制劑組和5-LOX抑制劑組,ALT水平低于COX-2抑制劑組。(3)蛋白及mRNA水平的檢測提示:模型組中5-LOX、COX-2、TNF-α較正常對(duì)照組均呈高表達(dá);COX-2抑制劑組中COX-2、TNF-α低于模型組,5-LOX高于模型組;5-LOX抑制劑組中5-LOX、TNF-α低于模型組,COX-2高
5、于模型組;聯(lián)合抑制組中5-LOX、COX-2、TNF-α均低于模型組,TNF-α分別低于COX-2抑制劑組和5-LOX抑制劑組。以上差異均以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:5-脂加氧酶(5-LOX)在大鼠酒精性肝炎的肝臟組織中表達(dá)上調(diào),加劇了酒精性肝炎的肝臟損傷;5-LOX抑制劑、COX-2抑制劑、以及兩種抑制劑聯(lián)合治療均可減輕酒精性肝炎的肝臟損傷,對(duì)酒精性肝炎有治療作用,其中兩種抑制劑聯(lián)合治療可能較單一抑制劑治療效果好;
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