瘦素及其受體OB-Rb、OB-Re在非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病機(jī)制中作用的研究.pdf

1、目的：采用高脂飲食喂養(yǎng)方法制備大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈法(RT-PCR)測(cè)定大鼠肝組織中OB-Rb、OB-RemRNA的表達(dá)情況，并檢測(cè)血清瘦素水平及其它各項(xiàng)生化指標(biāo)、肝組織病理變化情況，行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析以探討瘦素及其受體OB-Rb、OB-Re在非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法：選用健康雄性Wistar大鼠40只，體重195±15g。正常飼養(yǎng)1周后，將大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和高脂飲食誘導(dǎo)脂肪

2、肝模型組，每組20只，正常對(duì)照組給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)；高脂飲食組給予高脂飼料，即在標(biāo)準(zhǔn)飼料基礎(chǔ)上添加2％膽固醇和10％豬油。喂養(yǎng)20周后將全部大鼠宰殺，留取標(biāo)本用于以下項(xiàng)目檢測(cè)：用日本OlympusAU2700全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定空腹血糖(FBG)、血清甘油三酯(TG)；比色法測(cè)定血清游離脂肪酸(FFA)；用放射免疫法測(cè)定空腹血清胰島素(FINS)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平，按照HOMA模型計(jì)算空腹?fàn)顟B(tài)下胰島素抵抗指數(shù)IRI=(F

3、INS×FBF)/22.5；用ELISA法測(cè)定血清瘦素(LP)濃度；蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肝組織普通病理變化，SudanⅣ染色觀察肝細(xì)胞的脂肪變性程度，Masson三重染色觀察肝臟纖維化程度，并采用多功能病理圖像分析儀(北京航空航天大學(xué)研制)測(cè)定脂變和膠原纖維面積百分比；采用RT-PCR方法測(cè)定肝臟組織中OB-Rb、OB-RemRNA表達(dá)情況。 使用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，所有數(shù)據(jù)以(-x)±s表示，兩樣本均

4、數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，若P＜0.05，則認(rèn)為兩組數(shù)據(jù)差異有顯著性。直線相關(guān)法用于相關(guān)分析。 結(jié)論： 1.高脂飲食可以成功制備N(xiāo)ASH大鼠模型，脂代謝、糖代謝、各種細(xì)胞因子等的代謝紊亂是NASH形成的重要機(jī)制。 2.模型組大鼠血清瘦素濃度顯著高于對(duì)照組，表明NASH發(fā)病機(jī)制中有高瘦素血癥參與。且血清瘦素濃度與肝臟中OB-Rb、OB-RemRNA的表達(dá)量有相關(guān)性，提示血清瘦素水平增高可能參與調(diào)節(jié)瘦素受體的變化，是瘦素抵抗