腎癌Endostatin、VEGF和bFGF的表達(dá)及其與腫瘤微血管密度的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:腎癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率占全身惡性腫瘤的3％，僅次于膀胱癌，居泌尿系腫瘤第二位。腎癌的發(fā)病率和死亡率在過去的50年中持續(xù)上升。患者初診時(shí)約45％已有腫瘤轉(zhuǎn)移，50％的腎癌患者術(shù)后有腫瘤復(fù)發(fā)。多年來應(yīng)用分子免疫、基因治療以及抗腫瘤血管形成的分子靶向治療，對(duì)晚期或轉(zhuǎn)移性腎癌已取得令人滿意的療效。在腫瘤研究中，大量的腫瘤相關(guān)因子表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，包括腫瘤細(xì)胞增殖相關(guān)因子、生長因子等。血管生成(Angiogenesis

2、)是新血管從業(yè)已存在的成熟血管網(wǎng)中的穿生，對(duì)實(shí)體腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移起關(guān)鍵作用。腎癌是一種高度血管化腫瘤，研究證實(shí)其可以在體內(nèi)外高表達(dá)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)。內(nèi)皮抑素(Endostatin)是一種內(nèi)源性血管生成抑制因子，能特異抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管生成，其抗腫瘤活性在小鼠腫瘤模型得到證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯恳种坪痛龠M(jìn)血管生成的調(diào)控因子，包括Endostatin、VEGF和bFGF在腎癌發(fā)病中的

3、作用及其之間的相關(guān)性，為腎癌的生物學(xué)治療提供理論依據(jù)。 對(duì)象和方法:本研究所用病例取白天津市泌尿外科研究所，天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院2005年1月～2007年10月手術(shù)切除腎細(xì)胞癌組織標(biāo)本且臨床資料齊備者50例。男26例，女24例；年齡37～78歲，平均年齡62.7歲。按WHO分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，G115例，G224例，G311例。采用Robson分期，I期14例，II期21例，III10例，IV期5例。另取腫瘤旁>2cm區(qū)域的正常腎組織3

4、0例作為正常對(duì)照組。所有染色切片均由兩位富有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)生在同一條件下用Olympus光學(xué)顯微鏡采用雙盲法閱片。Endostatin、VEGF及bFGF蛋白陽性為腫瘤細(xì)胞胞漿表達(dá)棕黃色顆粒。為精確判斷蛋白的表達(dá)程度及減少假陽性率，記分標(biāo)準(zhǔn)參照許良中等的方法，隨機(jī)選擇10個(gè)高倍視野共記錄1000個(gè)腎癌細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞漿的著色程度及著色細(xì)胞的百分率進(jìn)行評(píng)分計(jì)算陽性系數(shù)。腫瘤微血管密度(MVD)檢測，在低倍光鏡(×100)下瀏覽整個(gè)切片視野，選

5、取血管密度最高的區(qū)域，然后轉(zhuǎn)換高倍鏡(×200)對(duì)該視野進(jìn)行仔細(xì)觀察計(jì)數(shù)。同法順序計(jì)數(shù)多個(gè)高倍鏡視野(HPF)，取平均值，最終結(jié)果表示為每高倍視野平均微血管數(shù)。統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS13.0軟件包。計(jì)量資料以-x±s表示，計(jì)數(shù)資料以率或百分比表示，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:(1)Endostatin蛋白在癌旁正常腎臟組織中的表達(dá)率為36.7％，在腎癌組織中為76％，在腎癌組織中的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于癌旁正常腎臟組織(

6、X2=14.892，P<0.01)。Endostatin蛋白表達(dá)水平在III～I(xiàn)V期的病例中呈高表達(dá)，與I～I(xiàn)I期的病例比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)VEGF蛋白在癌旁正常腎臟組織中的表達(dá)率為20％，在腎癌組織中為74％，在腎癌組織中VEGF的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于癌旁正常腎臟組織(X2=23.636，P<0.01)。VEGF蛋白表達(dá)水平在高分期，有腫瘤轉(zhuǎn)移的病例中呈高表達(dá)，與低分期，無腫瘤轉(zhuǎn)移的病例比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

7、<0.05)。(3)在癌旁正常腎組織檢測到bFGF呈弱陽性表達(dá)，表達(dá)率為23.3％，在腎癌組織中，表達(dá)率為68％。在腎癌組織中的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于癌旁正常腎臟組織(X2=16.426，P<0.01)。bFGF蛋白表達(dá)水平在高分期，有腫瘤轉(zhuǎn)移的病例中呈高表達(dá)，與低分期，無腫瘤轉(zhuǎn)移的病例比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(4)腎癌組織中的MVD均值為(35.62±11.38)，明顯高于癌旁正常腎臟組織(18.71±9.53)(t＝6.8

8、24，P<0.01)。分期III～I(xiàn)V期MVD(41.29±10.65)顯著高于I～I(xiàn)I期(24.74±7.83)(P<0.01)；MVD在組織學(xué)分級(jí)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(5)Endostatin、VEGF、bFGF及MVD在腎癌組織中表達(dá)的相互關(guān)系顯示，Endostatin與MVD的表達(dá)具有相關(guān)性(P<0.05)，VEGF與MVD的表達(dá)，bFGF與MVD的表達(dá)具有顯著相關(guān)性(P<0.01)：Endostatin與VE

9、GF的表達(dá)，Endostatin與bFGF的表達(dá)及VEGF與bFGF的表達(dá)均具有顯著相關(guān)性(P<0.01)。 結(jié)論:(1)研究發(fā)現(xiàn)Endostatin、VEGF、bFGF、MVD在腎癌中表達(dá)顯著高于癌旁的正常腎臟組織。(2)腎癌Endostatin、VEGF、bFGF表達(dá)與MVD有顯著相關(guān)性，證實(shí)Endostatin、VEGF、bFGF是腎癌血管生成的關(guān)鍵調(diào)控因子。(3)Endostatin、VEGF、bFGF在腎癌組織的表達(dá)與