抗ErbB2嵌合抗體chA21的大規(guī)模純化工藝的建立及質量研究.pdf

1、ErbB2是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，屬于表皮生長因子受體家族，在多種癌細胞特別乳腺癌中有高表達，針對其的單克隆抗體具有潛在的治療效果。本實驗室自行研制的抗ErbB2嵌合抗體chA21具有抑制高表達ErbB2乳腺癌細胞生長的作用。本論文從chA21的大規(guī)模純化生產(chǎn)工藝、質量研究以及工藝改進進行了研究： 1、以填充床生物反應器大規(guī)模培養(yǎng)CHO工程細胞株表達的上清為原料，采用親和層析、凝膠過濾除鹽、陽離子交換層析、分子篩等步驟

2、，分離純化嵌合抗體chA21，建立大規(guī)模純化工藝。該工藝能有效解決抗體純化過程形成的多聚體問題，去除內毒素和DNA殘留；可以確保每批純化10L～20L培養(yǎng)上清，蛋白總回收率大于50％，純度可達98％。 2、按照國家對生物制品的質量要求，對大規(guī)模生產(chǎn)的chA21原液產(chǎn)品進行了全面鑒定和質量控制，主要包括含量鑒定、純度和雜質污染物的檢測、理化性質鑒定、生物學活性測定等。鑒定結果表明制備的chA21產(chǎn)品符合動物實驗和臨床試驗的要求。