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文檔簡介
1、針對治療型單克隆抗體純化工藝中的關鍵問題,本論文利用表面等離子體共振(SPR)技術研究了疏水電荷誘導層析(HCIC)配基與抗體蛋白質的相互作用,對于表面和溶液的多種因素對相互作用的影響進行了考察。
采用自組裝技術在金襯底上構建了兩種不同密度的HCIC配基表面模型。分別利用X射線光電子能譜(XPS)、X射線吸收精細結構(NEXAFS)、接觸角和表面等離子體共振(SPR)對表面化學與結構、離子化和蛋白質結合進行了考察。采用SPR技
2、術系統(tǒng)研究配基密度和溶液因素(如鹽濃度、pH值)對抗體和白蛋白吸附的影響。我們的實驗結果表明,配基密度對相互作用的熱力學和動力學都有影響。值得注意的是,高配基密度能夠提高結合強度,增大吸附速率,降低解離速率并會導致特異性降低。在中性條件下,疏水作用和氫鍵作用都對蛋白質吸附有很大的貢獻,而在酸性條件下則會被靜電排斥力超過。
此外,本論文通過利用配基對鐵磁性納米顆粒進行修飾構建了新穎的抗體蛋白分離體系,該體系易于小量、快速分離抗體
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