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文檔簡(jiǎn)介
1、流行性感冒簡(jiǎn)稱流感,是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染性疾病。流感發(fā)病快,傳染性強(qiáng),發(fā)病率高。目前防止流感最有效的手段依舊是接種流感疫苗。在流感爆發(fā)期間,適當(dāng)及時(shí)的疫苗接種可明顯減少流感發(fā)病率和死亡率。但由于當(dāng)前流感疫苗生產(chǎn)工藝的限制,一旦大流行流感爆發(fā),不可能在短時(shí)間內(nèi)向接種人群提供足量的疫苗。在流感疫苗中使用佐劑不僅可以增強(qiáng)疫苗抗原免疫原性,還可以降低抗原用量。特別在應(yīng)對(duì)大流行流感時(shí),使用佐劑節(jié)約抗原用量進(jìn)而使更多的人群在爆發(fā)期間能夠
2、及時(shí)接種疫苗顯得尤為重要。
乳劑作為疫苗佐劑已經(jīng)具有一定的應(yīng)用,納米乳劑是粒徑小于100nm的乳劑,是由水相、油相、表面活性劑和助表面活性劑形成的穩(wěn)定體系。其中連續(xù)相為油相、分散相為水相的納米乳劑為W/O型。本研究選用實(shí)驗(yàn)室已有配方中安全性和質(zhì)量比最優(yōu)化體系組合,即表面活性劑(TW-80)、助表面活性劑(1,2-丙二醇)、油相(IPM)體系。采用水相滴定法,將流感疫苗水溶液作為納米乳劑成分中的水相,制備成W/O型納米乳劑流
3、感疫苗,考察了W/O型納米乳劑的佐劑效應(yīng)。
我國(guó)中草藥資源豐富,眾多研究已經(jīng)證明很多中草藥具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、增強(qiáng)免疫反應(yīng)的功能。中草藥是一種值得開(kāi)發(fā)和利用的優(yōu)勢(shì)資源,有希望開(kāi)發(fā)成為一類新型疫苗佐劑。本研究對(duì)天冬提取物及其他幾種中草藥提取物的免疫佐劑效果做了進(jìn)一步研究。并且在實(shí)驗(yàn)室前期初步實(shí)驗(yàn)證明天冬提取物具有免疫佐劑效應(yīng)基礎(chǔ)上,應(yīng)用二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合方法以天冬提取物及流感疫苗HA含量作為2個(gè)關(guān)鍵因素設(shè)計(jì)分組,將HI效價(jià)
4、作為響應(yīng)值,使用SAS V9.1軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,對(duì)天冬提取物及疫苗劑量組合進(jìn)行研究與優(yōu)化,并得出最佳響應(yīng)值對(duì)應(yīng)的二者劑量。
將以上制備的不同佐劑型流感疫苗與H3N2流感滅活疫苗共同肌肉免疫小鼠,以滅活疫苗的單獨(dú)免疫組、滅活疫苗與氫氧化鋁共同免疫組、生理鹽水免疫組作為對(duì)照組,于0d、21d進(jìn)行免疫,取尾血收集血清,測(cè)定HI抗體效價(jià)檢測(cè)及IgG抗體及亞類含量檢測(cè)。并以HI效價(jià)作為響應(yīng)值,使用SAS V9.1軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,
5、對(duì)天冬提取物及疫苗劑量組合進(jìn)行研究,并得出最佳響應(yīng)值對(duì)應(yīng)的二者劑量。并對(duì)納米乳劑組、天冬提取物組及對(duì)照組小鼠處死前2周進(jìn)行第3次免疫,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)進(jìn)行解剖,取脾臟做淋巴細(xì)胞在體外的細(xì)胞增殖反應(yīng)。并取納米乳劑組小鼠心、肝、肺、腎、腦做了病理切片研究;對(duì)初次進(jìn)行佐劑效果研究的中草藥組別的小鼠增長(zhǎng)體重進(jìn)行了檢測(cè),初步考察對(duì)小鼠機(jī)體的安全性。
研究顯示,納米乳劑及部分中草藥提取物都不同程度的顯示出較好的佐劑效果;納米乳劑組小鼠主要臟
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