鴨源新城疫油乳劑滅活疫苗制備的研究.pdf

1、鴨源新城疫（即鴨源新城疫病毒?。┦怯尚鲁且卟《荆带喸葱鲁且卟《荆┮鸬囊活惣毙?、高度接觸性和致死性的傳染病。近年來鴨源新城疫病毒的感染日漸增多,2001至2005年間，張訓海(2001)、張存(2002)、陳少鶯(2004)、何永強(2005)等學者分別從安徽、福建、浙江等地不同患病鴨群中都分離到了鴨源新城疫病毒，本病發(fā)病率和死亡率較高，對養(yǎng)鴨業(yè)危害嚴重。疫苗接種是控制該病的有效措施之一，但目前我國尚未有商品化的鴨源新城疫疫苗供應(yīng)，故

2、研制鴨源新城疫滅活疫苗對促進和保護養(yǎng)鴨業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。為此我們利用分離的鴨源新城疫病毒，研制了鴨源新城疫滅活油乳劑疫苗，并對該疫苗的安全性、穩(wěn)定性、免疫效力等進行了研究。
　　 本研究分別對鴨源新城疫病毒SDFCH株及新城疫病毒LaSota株的毒力、增殖特性、免疫特性及特異性等生物學特性進行了研究。鴨源新城疫病毒SDFCH株靜脈致病指數(shù)為2.59、對雞胚的最小致死量的平均死亡時間為56.6h、對10日齡雞胚的致死率為1

3、0/10、紅細胞凝集價為1:128、病毒含量為107.67EID50/0.1mL、免疫原性良好、能夠被鴨源新城疫病毒SDFCH株陽性血清中和。新城疫LaSota株對雞腦內(nèi)致病指數(shù)為0.41、對10日齡雞胚的致死率為8/10、紅細胞凝集價為1:256、病毒含量為108.0EID50/0.lmL、接種2-7日齡SPF雛雞安全、能夠特異性被新城疫陽性血清中和。采用鴨源新城疫病毒SDFCH株和新城疫病毒LaSota株分別接種9-12日齡SPF雞

4、胚，得到病毒含量分別是107.67EID50/0.1mL和108.0EID50/0.lmL的兩種病毒液。兩種病毒液均用最終濃度為0.1％的甲醛溶液滅活。制成2批油乳劑滅活疫苗。經(jīng)過物理性狀檢驗，疫苗均為乳白色油包水劑型；取疫苗樣品10mL裝于離心管中，以3000r/min離心15min,2批疫苗樣品均不分層；用lmL吸管(上口內(nèi)徑2.7mm，下口內(nèi)徑1.2mm)，吸取25℃左右的疫苗樣品lmL，讓其垂直自然流出，記錄流出0.4mL所需的

5、時間,2批疫苗樣品流出時間均在8秒以內(nèi)。研制的鴨源新城疫病毒SDFCH株滅活疫苗通過頸部皮下或胸部肌肉分別注射4-5周齡SPF雞10只及非免疫雛鴨10只，每只疫苗1.0mL，觀察14日，全部存活，且未出現(xiàn)因疫苗引起的局部和全身不良反應(yīng)。分別用病毒含量為101.0EID50/mL-108.5EID50/mL的鴨源新城疫病毒SDFCH株和新城疫F48E10株病毒液對26-90日齡的SPF雛雞及26-51日齡的非免疫雛鴨攻毒，觀察14日，結(jié)果

6、顯示SDFCH株及F48E10株對26-90日齡的SPF雛雞的最小致死量為103.0EID50/mL；SDFCH株對26-51日齡的雛鴨的最小致死量為108.5EID50/mL。將研制的鴨源新城疫病毒SDFCH株滅活疫苗和新城疫LaSota滅活苗通過頸部皮下分別免疫4-5周齡SPF雞、非免疫雛鴨各15只，接種21日后采血，分離血清。免疫雞、鴨新城疫、鴨源新城疫病毒SDFCH株HI抗體效價均高于1:16，對照雞、鴨血清HI抗體檢測為陰性。

7、當各免疫組HI效價達到24以上時，在SDFCH株攻毒下，雞和鴨均能獲得100％的保護。當HI效價在24以下時，鴨源新城疫滅活疫苗免疫的試驗鴨組，對DPMV（SDFCH株）和NDV（F48E10）強毒株的保護率皆為80％；而用新城疫滅活疫苗免疫的試驗鴨組，對DPMV(SDFCH株)保護力僅在67.7％，對NDV(F48E10株)保護力為83.3％。對照組在強毒的攻毒下則100％的死亡。研制疫苗的免疫持續(xù)期試驗和疫苗保存期試驗表明，疫苗免疫