齦溝液中MMPs含量與不同年齡組大鼠正畸牙根吸收的相關(guān)性研究.pdf

1、正畸牙根吸收的發(fā)病率高，嚴(yán)重的牙根吸收可引起牙根尖不可復(fù)性變短變鈍，從而導(dǎo)致牙齒冠根比失調(diào)，牙齒松動(dòng)，甚至脫落。目前對(duì)于牙根吸收尚無(wú)有效的治療方法，只能通過(guò)早期發(fā)現(xiàn)、去除病因，從而防止其進(jìn)一步發(fā)展。而臨床上常用的檢測(cè)牙根吸收的方法是根尖X線片，其存在著不清晰、敏感性差、有輻射等缺點(diǎn)，無(wú)法在早期發(fā)現(xiàn)牙根吸收。如果能在早期診斷出牙根吸收，那么對(duì)于防止其進(jìn)一步發(fā)展、促進(jìn)其修復(fù)具有重要意義?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)參與降解包括骨在內(nèi)的全身各種

2、組織的細(xì)胞外基質(zhì)，有研究表明基質(zhì)金屬蛋白酶是參與牙周組織改建的主要酶類，可能與牙根吸收有關(guān)。齦溝液(GCF)是牙齦溝中的滲出液，其成分隨著周圍組織的變化而改變，其中包括基質(zhì)金屬蛋白酶。由于齦溝液提取方便、無(wú)創(chuàng)、快捷，通過(guò)檢測(cè)齦溝液中某些物質(zhì)的改變來(lái)診斷疾病、監(jiān)測(cè)病程、了解治療效果已被牙周科醫(yī)師廣泛應(yīng)用。 目的: 本研究首先構(gòu)建大鼠正畸牙根吸收的動(dòng)物模型，然后通過(guò)測(cè)定大鼠牙齒受正畸力后齦溝液中MMP-1和MMP-9的含量變

3、化，觀察兩者與根吸收的相關(guān)性。并觀察不同年齡組大鼠牙齒受正畸力后齦溝液中MMP-1和MMP-9的含量變化的差異。從而試著尋找一種可能的與牙根吸收有關(guān)的指標(biāo)，為臨床上早期檢測(cè)正畸牙根吸收提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 選擇48只SPF級(jí)健康雌性Wistar大鼠作為研究對(duì)象，其中6周齡28只，體重(160-180)g；12周齡20只，體重(200-230)g。2％鹽酸氯胺酮腹腔注射麻醉后，在大鼠上頜安裝正畸加力裝置，以大鼠上頜

4、兩中切牙為支抗，采用粘接劑聯(lián)合磨溝固位法，施加50g較大拉力牽引一側(cè)第一磨牙向近中，從而建立大鼠正畸牙根吸收的動(dòng)物模型，每周加力一次。另一側(cè)作為對(duì)照側(cè)，僅在第一磨牙牙頸部用結(jié)扎絲環(huán)扎。在第1、2、4、7周分別處死2只6周齡大鼠，制作實(shí)驗(yàn)牙的組織學(xué)切片，觀察牙根吸收的發(fā)生情況。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每周提取其余40只大鼠實(shí)驗(yàn)牙及對(duì)照牙的齦溝液，并應(yīng)用SDS-PAGE，Western blot和Gel-Doc凝膠成像系統(tǒng)定量檢測(cè)齦溝液中MMP-1和M

5、MP-9含量的改變。根據(jù)大鼠年齡，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為青少年組和成年組。應(yīng)用SPSSll.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)各組大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)齦溝液中MMP-1和MMP-9含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果: 1.Wistar大鼠的上頜第一磨牙正畸牙根吸收發(fā)生于加力后的第2周，病理切片上表現(xiàn)為吸收陷窩的形成，多核巨噬細(xì)胞的出現(xiàn)等，且隨著加力時(shí)間的延長(zhǎng)，牙根吸收越來(lái)越嚴(yán)重。 2.無(wú)論青少年組大鼠還是成年組大鼠、實(shí)驗(yàn)側(cè)還是對(duì)照側(cè)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的GCF

6、量均高于實(shí)驗(yàn)前(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)中各周之間的GCF量差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各周，實(shí)驗(yàn)側(cè)的GCF量均高于對(duì)照側(cè)(P<0.05)；成年組大鼠的GCF量高于青少年組大鼠(P<0.05)。 3.兩組大鼠的MMP-1和MMP-9含量在實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)均是自加力第1周開(kāi)始升高(與0周相比P<0.05)，第2周時(shí)含量大幅增多(與第1周相比P<0.001)，至第3周時(shí)達(dá)高峰，從第4周開(kāi)始回落，至第7周最低，但仍高于加力

7、前的水平。 4.在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各周，青少年組和成年組大鼠的MMP-1含量實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)側(cè)高于對(duì)照側(cè)；兩組大鼠的MMP-9含量實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5.青少年組大鼠和成年組大鼠齦溝液中MMP.1和MMP一9含量的基礎(chǔ)水平(即安裝正畸加力裝置前的水平)以及在加力第1周時(shí)的水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但成年組比青少年組稍高。成年組大鼠較青少年組大

8、鼠GCF中MMPs含量的變化更為顯著。在實(shí)驗(yàn)初期，成年組大鼠MMPs含量增長(zhǎng)速度快于青少年組；后期，成年組大鼠較青少年組大鼠的MMPs含量下降速度慢。 結(jié)論: 1.以大鼠上頜兩中切牙為支抗，采用粘結(jié)劑聯(lián)合磨溝固位法，施加50g拉力牽引一側(cè)第一磨牙向近中，可建立科學(xué)、簡(jiǎn)單、可靠的大鼠正畸牙根吸收的動(dòng)物模型。 2.本研究建立的大鼠正畸牙根吸收模型，從加力第2周起在組織學(xué)上就已開(kāi)始發(fā)生牙根吸收。 3.齦溝液中的