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文檔簡介
1、目的:乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率呈現(xiàn)年輕化、逐年上升的趨勢。近幾年由于細(xì)胞分離技術(shù)的快速發(fā)展,Bonnet等首次在人急性髓系白血病中分離出腫瘤干細(xì)胞,隨后Al-Hajj、Collins、Singh等分別從乳腺癌、前列腺癌、膠質(zhì)瘤等多種實(shí)體腫瘤中分離出腫瘤干細(xì)胞。自Al-Hajj等從人乳腺癌組織中分離出乳腺癌干細(xì)胞,乳腺腫瘤干細(xì)胞成為乳腺腫瘤研究的熱點(diǎn)。腫瘤干細(xì)胞因其獨(dú)特的干細(xì)胞特性以及在腫瘤中的重要作用越來越受到重視,被
2、認(rèn)為是腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移、治療抵抗和耐藥復(fù)發(fā)的根源。但在乳腺腫瘤中腫瘤干細(xì)胞與血管形成的關(guān)系如何,它在血管生成中所扮演的角色尚不清楚。ALDH1(aldehyde dehydrogenase class1,ALDH1)是乙醛脫氫酶(ALDH)家族成員之一,人類ALDH1基因定位于第9號染色體,是一種含鋅酶類,是與細(xì)胞內(nèi)醛氧化有關(guān)的解毒酶,主要介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)全反式維甲酸的合成,是催化細(xì)胞內(nèi)乙醛氧化為乙酸的溶脂酶,參與多種基因的表達(dá)與組織分
3、化,抵抗烷化類抗腫瘤藥物。ALDH1是一種新近發(fā)現(xiàn)的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物,表達(dá)于人體的多種腫瘤,其與腫瘤的關(guān)系尚未明確。CD133,最早被稱為AC133,又被稱為prominin-1,是prominin家族成員之一,是只表達(dá)于上皮細(xì)胞微絨毛等細(xì)胞膜突起部位的一類糖蛋白。CD133基因位于人類4號染色體上(4p15),包含37個(gè)外顯子,分子量約為120KD,CD133高表達(dá)于多種惡性腫瘤的腫瘤干細(xì)胞,被認(rèn)為是腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)記分子。CD13
4、3+腫瘤細(xì)胞與腫瘤的自我更新、多向分化、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及耐藥等均有一定的相關(guān)性。有多項(xiàng)研究顯示CD133陽性的腫瘤細(xì)胞可促進(jìn)腫瘤新血管的生成。目前有關(guān)檢測乳腺癌組織中ALDH1/CD133的表達(dá)與血管生成關(guān)系的研究,尚未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。為研究二者之間的關(guān)系,探討乳腺癌干細(xì)胞在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制及為臨床治療提供新的靶點(diǎn),本研究采用免疫組織化學(xué)單染SP法檢測CD34、CD105、VEGF在120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)情況,采用免疫
5、組織化學(xué)雙染SP法檢測ALDH1/CD133在120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)情況,探討ALH1+/CD133+乳腺浸潤性導(dǎo)管癌干細(xì)胞與血管生成的關(guān)系以及可能的作用機(jī)制,為乳腺癌的臨床診斷以及治療奠定理論基礎(chǔ)。
方法:⑴采用免疫組織化學(xué)單染SP法檢測120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中CD34、CD105、VEGF的表達(dá)情況。⑵采用免疫組織化學(xué)雙染SP法檢測120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中ALDH1/CD133的表達(dá)情況。⑶統(tǒng)計(jì)學(xué)
6、處理:采用SPSS17.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。ALDH1/CD133與臨床病理因素的關(guān)系采用X2檢驗(yàn);與血管生成指標(biāo)之間采用Pearson相關(guān)分析,計(jì)量資料以-X±S表示。α=0.05,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:①在120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中,ALDH1+/CD133+、ALDH1+/CD133-、ALDH1-/CD133+、ALDH1-/CD133-4種表型細(xì)胞在不同的病例呈現(xiàn)為均存在、存在1
7、-3種等不同方式。存在ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞的病例數(shù)為31例,所占比例為25.83%,存在ALDH1+/CD133-表型細(xì)胞的病例數(shù)為7例,所占比例為5.83%,存在ALDH1/CD133+表型細(xì)胞的病例數(shù)為58例,所占比例為48.33%,存在ALDH1-/CD133-表型細(xì)胞的病例數(shù)為110例,所占比例為91.67%。②ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞與ER表達(dá)有關(guān),與患者的年齡、腫瘤直徑、PR、Her-2、腫瘤的分級和
8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān);ALDH1-/CD133+表型細(xì)胞與ER、腫瘤分級有關(guān),與患者年齡、腫瘤直徑、PR、Her-2、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān);ALDH1+/CD133-、ALDH1-/CD133-表型細(xì)胞與患者的臨床病理因素均無關(guān)。③在120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中VEGF表達(dá)的陽性率為68.33%(82/120),CD34、CD105抗體標(biāo)記的腫瘤微血管密度平均值分別為26.93±9.02、17.63±8.59。ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞
9、與VEGF、CD34MVD、CD105MVD之間呈正相關(guān)(P<0.05),且與CD105MVD及VEGF的關(guān)系更密切(P<0.01)。④通過對同一組織的兩張連續(xù)切片進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞中VEGF呈陽性表達(dá)的病例有16例,占存在ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞病例數(shù)的51.61%。統(tǒng)計(jì)ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞與VEGF的共表達(dá)情況,結(jié)果顯示ALDH1+/CD133+表型細(xì)胞與VEGF表達(dá)有關(guān)(P<0
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