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文檔簡介
1、目的:建立小鼠百草枯中毒肺損傷模型,探討肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑在百草枯中毒肺損傷中的保護(hù)作用。
方法:選取健康清潔級雌性昆明小鼠36只,隨機(jī)分成對照組、百草枯模型組、卡托普利干預(yù)組、色甘酸鈉干預(yù)組,百草枯模型組18只小鼠,其余三組每組6只小鼠。對照組每只小鼠腹腔內(nèi)注射1ml生理鹽水,0.5h后及此后每12h每只小鼠腹腔注射1ml生理鹽水直至72h處死;百草枯模型組每只小鼠腹腔內(nèi)注射PQ一次性染毒(按30mg/Kg體重標(biāo)準(zhǔn)),染毒0.5
2、h后及此后每12h每只小鼠腹腔內(nèi)注射1ml生理鹽水至直至處死,8h、24h、72h三個時間點各處死6只;卡托普利干預(yù)組每只小鼠腹腔內(nèi)注射PQ一次性染毒(按30mg/Kg體重標(biāo)準(zhǔn)),染毒0.5h后及此后每12h每只小鼠腹腔內(nèi)注射卡托普利(按10mg/kg體重標(biāo)準(zhǔn))直至72h處死;色甘酸鈉干預(yù)組每只小鼠腹腔內(nèi)注射PQ一次性染毒(按30mg/Kg體重標(biāo)準(zhǔn)),染毒0.5h及此后每12h每只小鼠腹腔內(nèi)注射色甘酸鈉(按25mg/Kg體重標(biāo)準(zhǔn))直至7
3、2h處死。給藥造模后觀察小鼠的精神狀態(tài)、毛發(fā)及行為的改變等。觀察小鼠肺臟大體情況并取肺組織置于10%中性甲醛固定。百草枯模型組8h、24h所取肺組織只做HE染色;四組72h所取肺組織均做HE染色,Mason染色,COX-2、TGF-β1及CD68免疫組化等病理檢測。
結(jié)果:(1)百草枯模型組小鼠染毒后出現(xiàn)中毒癥狀,其癥狀隨著時間延長而逐漸加重,卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組小鼠中毒癥狀比百草枯模型組明顯減輕,但兩組小鼠的表現(xiàn)無
4、明顯差異。(2)對照組小鼠肺臟標(biāo)本形態(tài)正常,呈粉紅色,表面光滑。百草枯模型組、卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組小鼠肺臟體積明顯增大,表面大部分呈暗紅色,質(zhì)地中等,切面可見肺淤血和滲液,百草枯模型組上述改變最明顯。(3)HE染色顯示:對照組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整;百草枯模型組小鼠肺組織出現(xiàn)嚴(yán)重的炎癥性改變,肺損傷病理評分呈時間依賴性升高(P<0.05);卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組小鼠肺組織也出現(xiàn)炎癥反應(yīng),但較百草枯模型組明顯改善;與對照組相
5、比,其余三組72h肺損傷病理評分明顯增高(P<0.01);卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組肺損傷病理評分低于百草枯模型組,色甘酸鈉干預(yù)組低于卡托普利干預(yù)組(P<0.05);(4)Masson染色顯示:百草枯模型組、卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組的藍(lán)染密度高于對照組,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組低于百草枯模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);卡托普利干預(yù)組高于色甘酸鈉干預(yù)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<
6、0.05)。(5)百草枯模型組、卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組肺組織內(nèi)浸潤的CD68+巨噬細(xì)胞均明顯高于對照組(P<0.0001),卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組低于百草枯模型組(P<0.05),卡托普利干預(yù)組高于色甘酸鈉干預(yù)組(P<0.05)。(6)百草枯模型組、卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組肺組織內(nèi)COX-2表達(dá)均明顯高于對照組(P<0.01),卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組低于百草枯模型組(P<0.05),卡托普利干預(yù)組高于色甘酸
7、鈉干預(yù)組(P<0.05)。(7)百草枯模型組、卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組肺組織內(nèi)TGF-β1表達(dá)均明顯高于對照組(P<0.01),卡托普利干預(yù)組及色甘酸鈉干預(yù)組低于百草枯模型組(P<0.05),卡托普利干預(yù)組高于色甘酸干預(yù)組(P<0.05)。
結(jié)論:(1)一次性腹腔注射PQ30mg/kg體重可建立昆明小鼠PQ中毒肺損傷模型;(2)色甘酸鈉干預(yù)可減少百草枯中毒小鼠肺組織炎性細(xì)胞的浸潤;(3)色甘酸鈉干預(yù)可減少百草枯中毒小鼠肺
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