小鼠ES細(xì)胞分化膽堿能神經(jīng)及淫羊藿素促分化機(jī)制研究.pdf

1、本課題旨在探索小鼠胚胎干細(xì)胞定向分化膽堿能神經(jīng)元過(guò)程中，記憶運(yùn)動(dòng)相關(guān)蛋白Junctophilin3和Junctophilin4表達(dá)及其特征。并探究淫羊藿素調(diào)控細(xì)胞微環(huán)境對(duì)小鼠ES細(xì)胞定向分化為膽堿能神經(jīng)的影響，及分化過(guò)程中線粒體相關(guān)信號(hào)通路可能的涉及環(huán)節(jié)。 RA誘導(dǎo)小鼠ES細(xì)胞定向分化過(guò)程中，外胚層標(biāo)志基因表達(dá)上升，細(xì)胞經(jīng)歷了從神經(jīng)前體細(xì)胞到成熟神經(jīng)細(xì)胞的過(guò)程。分化的神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)mAChR和ChAT，JP-3，4在前體細(xì)胞期表達(dá)

2、達(dá)峰值，在分化晚期反而下降。 胚胎發(fā)育期大鼠胚腦樣本JP-3，4基因、蛋白表達(dá)呈發(fā)育依賴性，但在成年大鼠大腦內(nèi)表達(dá)量下降。而海馬組織與ES細(xì)胞共培養(yǎng)未呈現(xiàn)促進(jìn)小鼠ES細(xì)胞的神經(jīng)分化。ICT具有促進(jìn)小鼠ES細(xì)胞定向分化為膽堿能神經(jīng)細(xì)胞作用，ERK抑制劑能發(fā)揮顯著拮抗作用。JC-1染色結(jié)果顯示ICT還具有促進(jìn)線粒體形成，維持正?！鳓譵作用，DAPI染色顯示ICT的促神經(jīng)定向分化過(guò)程，未引起RA樣細(xì)胞凋亡。 RA誘導(dǎo)小鼠ES細(xì)