生芪復(fù)方中藥對糖消耗影響的研究及機(jī)制探討.pdf

1、目的:本實驗用血清藥理學(xué)方法研究生芪復(fù)方中藥在體外實驗中對葡萄糖消耗的影響并對其機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　 方法:1.選用與胰島β細(xì)胞功能相似的INS--1細(xì)胞株，設(shè)溶媒對照組、生芪復(fù)方中藥處理組、格列齊特陽性對照組，酶聯(lián)免疫吸附法測定各實驗組在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基中胰島素釋放情況。2.選用國際通用脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化方案誘導(dǎo)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞為成熟脂肪細(xì)胞，油紅0染色鑒定，地塞米松誘導(dǎo)胰島素抵抗模型，設(shè)溶媒對照組、模型組、生芪

2、復(fù)方中藥處理組、羅格列酮陽性對照組，葡萄糖氧化酶法檢測葡萄糖消耗量，四甲基偶氨唑鹽(MTT)法檢測細(xì)胞活力并對葡萄糖消耗量進(jìn)行標(biāo)化，逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PT-PCR)測定葡萄糖轉(zhuǎn)運體4(GLUT4)mRNA含量。3.選用人源肝癌HepG2細(xì)胞株，同時采用高胰島素誘發(fā)HepG2細(xì)胞建立胰島素抵抗模型，設(shè)溶媒對照組、模型組、生芪復(fù)方中藥處理組、羅格列酮陽性對照組，葡萄糖氧化酶法檢測葡萄糖消耗量，MTT法檢測細(xì)胞活力并對葡萄糖消耗量進(jìn)

3、行標(biāo)化，PT-PCR法測定葡萄糖轉(zhuǎn)運體2(GLUT2)mRNA含量。
　　 結(jié)果:1.在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基中各劑量生芪復(fù)方中藥與相應(yīng)濃度的溶媒對照組比較促INS--1細(xì)胞胰島素釋放作用均無顯著差異（P均>0.05），而格列齊特各劑量均較相應(yīng)濃度的其他兩組有顯著促分泌作用（P均<0.05）。2.生芪復(fù)方中藥處理組3T3-L1葡萄糖消耗明顯高于模型組（P均<0.05），與羅格列酮組比較差異無顯著性(P>0.05)，降糖作用呈濃度依

4、賴性，并且隨培液中葡萄糖濃度的升高而呈降低趨勢，同時生芪復(fù)方中藥處理組與羅格列酮組GLUT4mRNA均明顯高于模型組(P均<0.05)。3.生芪復(fù)方中藥處理組HepG2葡萄糖消耗明顯高于模型組（P均<0.05），與羅格列酮組比較差異無顯著性(P>0.05)，降糖作用呈濃度依賴性，并且隨培液中葡萄糖濃度的升高而呈降低趨勢，同時生芪復(fù)方中藥處理組與羅格列酮組GLUT2mRNA均明顯高于模型組（P均<0.05）。
　　 結(jié)論:生芪復(fù)方