栗實(shí)象甲的病原真菌及其致病性研究.pdf

1、栗實(shí)象甲（Curculio davidi Fairmaire），又名栗實(shí)象鼻蟲，屬鞘翅目（Coleoptera），象甲科（Curculionidae），是為害板栗的重要害蟲。該蟲在我國大部分地區(qū)兩年發(fā)生一代，其幼蟲在果實(shí)內(nèi)部蛀食，最終使果實(shí)內(nèi)部蛀空，充滿蟲糞，失去板栗的食用價值和商品價值。目前，防治栗實(shí)象甲仍以樹冠噴灑化學(xué)農(nóng)藥為主，對栗實(shí)象甲成蟲可以起到一定的防治效果，但是對在果實(shí)內(nèi)部蛀食的幼蟲起不到防治作用。本研究以栗實(shí)象甲老熟幼蟲在

2、土中滯育時間長的特點(diǎn)為切入點(diǎn)，研究昆蟲病原真菌對栗實(shí)象甲的生物防治。
　　研究內(nèi)容：
　　1．在山西省昔陽縣洪川村板栗林設(shè)立試驗地，定期采樣并結(jié)合實(shí)驗室的解剖觀察，研究栗實(shí)象甲的發(fā)生、危害、形態(tài)特征的變化和生活習(xí)性。
　　2．化驗分析栗實(shí)象甲幼蟲蟲體氨基酸的種類及含量。
　　3．研究三株球孢白僵菌TST05、FDB01、SYN01對栗實(shí)象甲幼蟲的感染效果，包括感染癥狀、致死率、菌株三種胞外酶（蛋白質(zhì)酶、幾丁質(zhì)酶、

3、脂肪酶）活性的測定、菌株胞外酶活性變化與菌株毒力之間的相關(guān)性分析。
　　4．掃描電鏡觀察球孢白僵菌孢子在幼蟲蟲體上的附著、萌發(fā)和入侵過程。
　　5．從自然染菌的栗實(shí)象甲幼蟲蟲尸上分離獲得病原真菌，用光學(xué)顯微鏡和掃描電子顯微鏡對各菌株的形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行觀察鑒定，并用分子手段對各菌株作DNA分子鑒定，確定病原菌株的物種與分類地位。
　　研究結(jié)果：
　　1.山西省昔陽縣板栗蟲果率達(dá)到40％，栗實(shí)象甲大多數(shù)一年一代，完全變

4、態(tài)發(fā)育，每年9月末10月初栗實(shí)象甲老熟幼蟲開始脫果入土，第2年的5月份開始化蛹羽化為成蟲。因此，栗實(shí)象甲幼蟲從入土到成蟲出土之前，都可以作為病原真菌防治的時期。
　　2.栗實(shí)象甲幼蟲的蟲體含有17種氨基酸，豐富的氨基酸為白僵菌的生長提供了營養(yǎng)物質(zhì)，其中谷氨酸可以促進(jìn)病原真菌菌絲的生長，苯丙氨酸可以促進(jìn)分生孢子的形成。
　　3.三株球孢白僵菌（TST05、FDB01、SYN01）在感染栗實(shí)象甲過程中，幼蟲在染菌的第2天開始表現(xiàn)

5、染病癥狀，第3天開始死亡，第4天蟲體表面開始出現(xiàn)菌絲。菌株 SYN01對栗實(shí)象甲幼蟲的致死率最高（62.22%），致死速度最快，可以作為防治栗實(shí)象甲幼蟲的病原菌種。
　　4.病原真菌的類枯草桿菌蛋白酶（Pr1酶）與幾丁質(zhì)酶活性與菌株的毒力之間呈現(xiàn)顯著的線性相關(guān)關(guān)系，說明在真菌侵染和致死栗實(shí)象甲幼蟲過程中，這兩種胞外酶發(fā)揮了重要作用，并且可以作為篩選與評價菌株毒力的指標(biāo)。
　　5.掃描電鏡觀察到分生孢子主要附著在幼蟲的口器周圍