中藥提取物中有機(jī)溶劑殘留量的測(cè)定.pdf

1、目的:近年來(lái)，隨著中藥提取物在醫(yī)藥、食品、化妝品及保健品等方面的廣泛應(yīng)用，各國(guó)對(duì)中藥提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求日趨嚴(yán)格。中藥提取物中殘留有機(jī)溶劑系指在中藥提取物生產(chǎn)過(guò)程中使用或產(chǎn)生的而未能完全除去的有機(jī)揮發(fā)性化合物。殘留有機(jī)溶劑是一種潛在性的藥物毒性危險(xiǎn)，不僅對(duì)中藥提取物的穩(wěn)定性有影響，更重要的是危害使用者身體健康。殘留有機(jī)溶劑的毒性或致癌作用日益引起醫(yī)藥界的重視，人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)議(ICH)指導(dǎo)原則指出:“在藥物生產(chǎn)過(guò)程中盡

2、量避免一、二類有機(jī)溶劑的使用，維護(hù)中藥綠色、環(huán)保、健康的形象”。實(shí)際中需對(duì)其殘留溶劑含量進(jìn)行測(cè)定，并做出合理的判斷，以保證中藥提取物的質(zhì)量。
　　在殘留溶劑分析沿革中，檢測(cè)方法多種多樣。目前氣相色譜法普遍被各國(guó)藥典所采用。本文就是采用頂空毛細(xì)管柱氣相色譜法對(duì)大黃提取物、黃連提取物、五味子提取物、青蒿素提取物以及長(zhǎng)春花提取物中甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷等有機(jī)溶劑殘留量進(jìn)行檢測(cè)分析。目前常見(jiàn)利用頂空氣相色譜法測(cè)定藥物中有

3、機(jī)溶劑殘留量的相關(guān)報(bào)道，但對(duì)中藥提取物中有機(jī)溶劑殘留量的測(cè)定的研究還在發(fā)展階段。中藥提取物大都是成分復(fù)雜，有已知成分又有未知成分，水溶性較差。在實(shí)驗(yàn)中，以這五種提取物的成分特性和被測(cè)殘留溶劑的特性以及它們之間的相互影響為前提，通過(guò)多次試驗(yàn)，獲得了適合本次試驗(yàn)的最佳溶劑、頂空條件和色譜條件。本研究旨在為中藥提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供數(shù)據(jù)支持。
　　方法:
　　1收集大黃提取物、黃連提取物、五味子提取物、青蒿素提取物和長(zhǎng)春花提取物

4、r>　　大黃提取物、五味子提取物、青蒿素提取物來(lái)源于長(zhǎng)沙中仁生物科技有限公司;黃連提取液為石家莊第四制藥廠;黃連提取物浸膏為自制;長(zhǎng)春花提取物來(lái)源于陜西帕尼爾生物科技有限公司
　　2采用GC7900氣相色譜儀和DK-3001B型半自動(dòng)頂空進(jìn)樣器測(cè)定五種中藥提取物中有機(jī)溶劑的殘留量。
　　3采用氣相色譜法。色譜柱為ZB-1毛細(xì)管柱，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，柱溫為程序升溫，載氣為氮?dú)?，進(jìn)樣口溫度為200℃，檢測(cè)器溫度為230

5、℃。分離測(cè)定大黃、五味子和黃連提取物中乙醇和乙酸乙酯殘留量。
　　4采用氣相色譜法。色譜柱為DB-624毛細(xì)管柱，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，柱溫為程序升溫，載氣為氮?dú)?，進(jìn)樣口溫度為200℃，檢測(cè)器溫度為220℃。分別分離測(cè)定青蒿素提取物中乙酸乙酯和氯仿的殘留量和長(zhǎng)春花提取物中甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷的殘留量。
　　5采用D7900色譜工作站對(duì)色圖譜進(jìn)行分析;采用excel統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果:
　

6、　1在該色譜條件下，測(cè)得五味子提取物、大黃提取物和黃連提取物中乙醇和乙酸乙酯的線性范圍分別為0.0255～1.02mg/mL(r2=0.9985)和0.0258～1.03mg/mL(r2=0.9998);五味子提取物中乙醇和乙酸乙酯的平均回收率為98.9％和110％;黃連提取物中乙醇和乙酸乙酯的平均回收率為102％和111％、大黃提取物中乙醇和乙酸乙酯的平均回收率為101％和99.1％(RSD均＜5.0％);3種樣品中2種有機(jī)溶劑殘留量

7、均符合ICH要求。
　　2在該色譜條件下，測(cè)得青蒿素提取物中乙酸乙酯和氯仿兩溶劑分別在0.429～21.5mg/mL(r2=0.9956)和5.19～260μg/mL(r2=0.9997)范圍內(nèi)線性良好，平均回收率分別為99.0％和99.0％，RSD分別為1.97％和3.21％，青蒿素提取物中上述有機(jī)溶劑殘留量均符合ICH和GMP要求。
　　3所建立的長(zhǎng)春花提取物中殘留溶劑測(cè)定方法中各溶劑峰分離良好，甲醇、乙醇、二氯甲烷和三

8、氯甲烷四種溶劑線性范圍分別為0.299～5.98mg/mL(r2=0.9998)、0.490～9.80mg/mL(r2=0.9993)、0.0681～1.36mg/mL(r2=0.9991)、9.04～181μg/mL(r2=0.9992),RSD均＜5％,平均回收率分別為101％、104％、100％、111％。
　　結(jié)論:
　　1用DMF溶解五味子、大黃和黃連提取物，能使殘留溶劑更好揮發(fā)，而且不干擾測(cè)定結(jié)果，幾乎對(duì)色譜系統(tǒng)

9、無(wú)污染，是理想頂空溶劑。所建立的方法簡(jiǎn)單、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于三種提取物中有機(jī)溶劑殘留量的測(cè)定。
　　2應(yīng)用頂空氣相色譜、氫火焰離子化檢測(cè)器和DB-624毛細(xì)管色譜柱檢測(cè)青蒿素提取物和長(zhǎng)春花提取物中的溶劑殘留量。通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證，線性關(guān)系良好，分離度高，回收率高。所建立的方法準(zhǔn)確可行。
　　青蒿素提取物樣品中氯仿未檢出，乙酸乙酯含量低于ICH規(guī)定值。
　　長(zhǎng)春花提取物樣品中甲醇和二氯甲烷含量未超出ICH規(guī)定值，乙醇