農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化體系建立和遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、小麥?zhǔn)侵匾募Z食作物，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)轉(zhuǎn)化小麥?zhǔn)沁M(jìn)行小麥遺傳改良的重要途徑。本研究以27份優(yōu)良普通小麥fTriticumaestivum L.)品種．(系)為試材，進(jìn)行成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生培養(yǎng)，研究了愈傷組織形成及分化再生的影響因素對小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生能力的作用；利用篩選出來的農(nóng)藝性狀優(yōu)良、適合小麥成熟胚培養(yǎng)的小麥品系山農(nóng)2618進(jìn)行了成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化試驗，對農(nóng)桿菌介導(dǎo)外源基因轉(zhuǎn)化成熟胚愈傷組織的條件進(jìn)行了

2、研究。獲得以下主要結(jié)果： 1．通過對27個不同基因型小麥材料進(jìn)行成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生試驗，明確了小麥的基因型、成熟胚愈傷誘愈培養(yǎng)基2,4．D和NAA濃度是影響小麥成熟胚愈傷組織形成和分化再生的重要因素，確定了最佳誘愈的2,4-D和NAA濃度分別為2.0 mg 1<'-1>和0.5 mg 1<'-1>。篩選出12個適合小麥成熟胚培養(yǎng)和植株再生的基因型材料，建立了小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生體系，為小麥成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化研究

3、奠定了基礎(chǔ)。 2.以普通小麥品系山農(nóng)2618為材料，對影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥成熟胚愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素(侵染菌液的濃度、侵染時間、超聲波處理、真空處理等)進(jìn)行了試驗，初步建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的小麥成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化體系。結(jié)果表明：菌液濃度和侵染時間對愈傷組織的存活和轉(zhuǎn)化效果具有明顯影響，在菌液濃度為OD600=0.8，侵染時間為60min時，抗性愈傷的獲得率最高，達(dá)到4.21％；在農(nóng)桿菌侵染過程中，運用超聲波或真空輔助處理可以提高轉(zhuǎn)化