小麥再生體系及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、在小麥遺傳轉(zhuǎn)化中,幼胚及其愈傷組織是目前應(yīng)用得最成功的外植體。但是幼胚的取材受季節(jié)限制,因而嚴重限制了小麥轉(zhuǎn)基因研究的深入開展。而且,目前在小麥遺傳轉(zhuǎn)化中多以抗抗生素和除草劑類基因為選擇標(biāo)記,其對環(huán)境和人類具有潛在的危險,已經(jīng)對轉(zhuǎn)基因小麥的應(yīng)用前景產(chǎn)生了一定影響。因此拓寬轉(zhuǎn)基因小麥的受體范圍和使用安全標(biāo)記基因應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因研究勢在必行。為了建立一套高效的再生體系,本文以華中和長江中下游地區(qū)推廣的小麥品種為實驗材料,系統(tǒng)研究了不同小麥品種幼

2、穗和成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)和分化再生的特點;并以小麥幼胚為外植體,研究了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的以安全標(biāo)記基因manA為選擇標(biāo)記的遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。主要結(jié)果如下:
   1、研究了10個小麥品種幼穗不同節(jié)段的外植體,在不同誘導(dǎo)和分化條件下幼穗愈傷組織誘導(dǎo)再生頻率及其差異。結(jié)果表明中部穗段是最好的外植體,L7V誘導(dǎo)培養(yǎng)基和L7Z分化培養(yǎng)基是最好的誘導(dǎo)和分化培養(yǎng)基;愈傷組織誘導(dǎo)、愈傷組織生根和成苗均具有明顯的基因型效應(yīng),但三者之間沒有顯著的相關(guān)性。揚麥

3、158和華麥13具有較高的分化再生能力,是遺傳轉(zhuǎn)化的良好受體。
   2、研究了3個小麥品種成熟胚的外植體,在不同誘導(dǎo)和分化條件下的離體培養(yǎng)再生頻率。結(jié)果顯示基因型是影響小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)和分化再生頻率的重要因素,不同小麥品種在愈傷組織誘導(dǎo)和分化能力上均達到了顯著差異,華麥9號具有較高的分化再生能力,是遺傳轉(zhuǎn)化的良好受體;在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中適當(dāng)添加ABA和AgN03,可促進胚性愈傷組織形成并提高再生分化率;分化培養(yǎng)前適當(dāng)?shù)母稍锾?/p>

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