慢性疼痛對神經(jīng)系統(tǒng)microRNA表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、慢性疼痛是全球重大公共衛(wèi)生問題之一,常伴有不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)病理改變,而這些主要是由于相應(yīng)基因的表達水平發(fā)生變化所致。MicroRNA(miRNA)是長為19~24個核苷酸的非編碼小RNA,可調(diào)控基因的表達。它們與細胞增殖、分化、凋亡和腫瘤發(fā)生等密切相關(guān)。很多疾病的miRNA表達譜都已明確,但與慢性疼痛相關(guān)的miRNA表達譜尚未明確。
   目的:
   本研究首次應(yīng)用miRNA芯片篩選慢性神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓背角差異

2、表達的miRNA,并預(yù)測其調(diào)控的靶基因,為進一步闡明其在慢性疼痛機制中的作用打下基礎(chǔ),也為進一步的疼痛治療提供可能的靶點。
   方法:
   雄性SD大鼠40只隨機分為5組(n=8):NaIve組、Sham組、CCI組、CFA組與NS組,建立CCI(ChronicConstrictiveInjury)模型和CFA(CompleteFreudAdjuvant)模型。取腰膨大脊髓背角,運用miRNA芯片技術(shù)篩選CCI模型差

3、異表達的miRNAs,再用miRNAs特異的引物進行熒光實時定量RT-PCR驗證差異表達的miRNAs。進而用熒光實時定量RT-PCR驗證CFA模型中相關(guān)miRNAs的表達水平。利用nuRNA靶基因數(shù)據(jù)庫預(yù)測差異表達miRNAs可能調(diào)控的靶基因。
   結(jié)果:
   CCI模型和CFA模型手術(shù)側(cè)后足機械性痛閾和熱痛敏閾值顯著下降(P<0.05),表明兩種模型均已成功建立。miRNA芯片結(jié)果顯示,CCI組與Sham組及Na

4、ive組相比,表達水平上調(diào)的有nuR-99b,表達水平下調(diào)的有miR-34b、m1R-325-5p、miR-349、miR-674-3p與miR-879。熒光實時定量RT-PCR結(jié)果與miRNA芯片結(jié)果基本相符。CFA模型miR99b表達上調(diào),nuR-674-3p表達下調(diào)。分別利用三個數(shù)據(jù)庫MIRANDA、TARGETSCAN、PICTAR對miRNA的靶基因進行分析,取其交集進行綜合分析。
   結(jié)論:
   CCI神

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