大豆過(guò)氧化物酶的酶學(xué)特性與應(yīng)用研究.pdf

1、大豆過(guò)氧化物酶是一種由單一肽鏈與卟啉構(gòu)成的血紅素蛋白，脫輔基蛋白分子與血紅素結(jié)合構(gòu)成全酶。大豆過(guò)氧化物酶的分子量約為39～41kD，由306個(gè)氨基酸殘基組成，并含有大約分子量的18％的糖基。其等電點(diǎn)為3.9，屬于酸性蛋白質(zhì)。 本文在實(shí)驗(yàn)室對(duì)大豆過(guò)氧化物酶分離純化研究的基礎(chǔ)上，對(duì)自己純化所得的酶進(jìn)行酶學(xué)特性的研究。結(jié)果表明，大豆過(guò)氧化物酶的溫度和pH適用范圍很寬，熱穩(wěn)定性、酸堿穩(wěn)定性很高，并且在含有較高濃度有機(jī)溶劑的反應(yīng)體系中的保

2、持很好的酶活力，同時(shí)研究了一般常見(jiàn)化合物對(duì)酶活性的影響，以及測(cè)定了部分酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)參數(shù)。 同時(shí)本文開(kāi)展了大豆過(guò)氧化物酶的應(yīng)用研究。選取大豆過(guò)氧化物酶在免疫診斷試劑中的應(yīng)用為研究的突破口。先制備大豆過(guò)氧化物酶與抗體的結(jié)合物，再把結(jié)合物用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，采用雙抗體夾心法，檢測(cè)目標(biāo)抗原的濃度。用此方法來(lái)證明自己純化的大豆過(guò)氧化物酶用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定的可行性，并比較大豆過(guò)氧化物酶與抗體的結(jié)合物和辣根過(guò)氧化物酶與抗體的結(jié)合物在檢測(cè)