IL-1和IL-6基因多態(tài)性與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病和慢性牙周炎相關(guān)性的研究.pdf

1、冠心病是一類復(fù)雜的多因素慢性疾病，目前公認(rèn)炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致冠心病的重要機(jī)制，因局部或全身感染等原因誘發(fā)循環(huán)或動(dòng)脈內(nèi)膜局部炎性細(xì)胞因子的升高，從而造成血管內(nèi)皮功能異常，促進(jìn)血小板凝血、平滑肌細(xì)胞增殖、結(jié)締組織合成增加、脂質(zhì)浸潤(rùn)最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。慢性牙周炎是發(fā)生在牙周支持組織的慢性非特異性炎性疾病，是成人口腔中最為常見(jiàn)的感染性疾病。近年來(lái)，大量流行病學(xué)、臨床治療學(xué)、病理學(xué)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)等證據(jù)支持牙周炎和冠心病有關(guān)。冠心病的發(fā)生率與牙周狀況相

2、關(guān)：牙齦炎與冠心病無(wú)明顯關(guān)系；慢性牙周炎是冠心病的危險(xiǎn)因素；牙齒缺失、牙周附著喪失和牙槽骨吸收較多的牙周炎患者發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)率高。牙周干預(yù)治療可以降低與冠心病有關(guān)的血清標(biāo)志物，改善血管內(nèi)皮功能，降低冠心病的風(fēng)險(xiǎn)。牙周炎是動(dòng)脈粥樣硬化，心肌梗死，心血管事件的中度危險(xiǎn)因素。因牙周感染導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)，可能是牙周炎影響冠心病的重要機(jī)制。 IL-1、IL-6是參與炎癥反應(yīng)重要的細(xì)胞因子，具有強(qiáng)效促炎作用，大量研究資料顯示這兩種細(xì)胞因子與

3、冠心病和慢性牙周炎發(fā)病及病變程度有關(guān)。IL-1、IL-6能誘導(dǎo)牙周前體細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞，激活單核巨噬細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)，介導(dǎo)牙槽骨吸收和膠原降解。牙周炎病變部位齦溝液的量和IL-1、IL-6水平與牙周病變程度有關(guān)。IL-1可引起血管擴(kuò)張和血管通透性增加，誘導(dǎo)黏附分子和趨化因子的表達(dá)，使血管壁炎性細(xì)胞聚集，血管平滑肌細(xì)胞增生、血管壁局部血栓形成；IL-1誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化病灶的局部炎性細(xì)胞表達(dá)IL-6。11-6具有調(diào)節(jié)血脂代謝、參與炎癥反應(yīng)

4、、介導(dǎo)白細(xì)胞的粘附與聚集等多種功能，可刺激血管活性物質(zhì)的釋放，誘導(dǎo)纖維蛋白原分泌和肝急性蛋白的合成。血管壁細(xì)胞包括內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及心肌細(xì)胞均可產(chǎn)生IL-6，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊區(qū)尤其是富含巨噬細(xì)胞區(qū)存在IL-6的大量表達(dá)，冠心病的發(fā)展、嚴(yán)重程度，斑塊的不穩(wěn)定性以及預(yù)后均與血清IL-6水平存在一定的關(guān)系，IL-6是預(yù)測(cè)冠心病、心肌梗死危險(xiǎn)度的重要炎性標(biāo)志物。 冠心病和慢性牙周炎都是一類復(fù)雜的與多基因相關(guān)的疾

5、病，都與炎癥有關(guān)。本研究推測(cè)可能存在共同的基因背景，特別是決定炎性細(xì)胞因子表達(dá)的基因，在牙周感染狀態(tài)下，可能影響局部或全身炎性因子的表達(dá)，從而影響對(duì)慢性牙周炎或冠心病的易感性。篩選慢性牙周炎和冠心病共同易感基因，對(duì)這兩種疾病特別是冠心病的早期診斷、個(gè)性化治療有指導(dǎo)意義。近二十年，在國(guó)內(nèi)外口腔牙周病學(xué)和心血管病學(xué)領(lǐng)域，陸續(xù)有資料分別報(bào)道IL-1、IL-6相關(guān)基因多態(tài)性與慢性牙周炎特別是中重度牙周炎或冠心病的易感性有關(guān)，如Kornmann等

6、報(bào)道在北歐高加索人群中IL-1A-889和IL-1B+3953的復(fù)合等位基因Ⅱ在非吸煙人群中與牙周炎的嚴(yán)重程度有著密切的關(guān)系；在巴西高加索人群中，攜帶IL-6-174G等位基因是中重度慢性牙周炎的風(fēng)險(xiǎn)因素；Humphrises和Georges等報(bào)道IL-6-174基因多態(tài)性是歐洲人發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)因素，-174C等位基因攜帶者為心肌梗死的高危人群。付海霞、劉永生等研究顯示IL-6-572位點(diǎn)的多態(tài)性與漢族人群發(fā)生冠心病相關(guān)，可能是心肌梗

7、死易感因子等等。目前多數(shù)研究集中在IL-1，IL-6相關(guān)基因多態(tài)性對(duì)慢性牙周炎或冠心病單病種的影響，探索與兩種疾病共同相關(guān)的研究較少見(jiàn)。此外，基因變異存在地區(qū)、種族差異，大多數(shù)相關(guān)研究的人群是歐洲或美非等人群，在漢族人群中IL-1、IL-6相關(guān)基因多態(tài)性對(duì)兩種疾病易感性的共同影響不清楚。 采用病例-對(duì)照設(shè)計(jì)，用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性基因分析方法（PCR-RELP法），檢測(cè)炎性細(xì)胞因子IL-1、IL-6六個(gè)基因突

8、變位點(diǎn)IL-1B+3954C/T、IL-1B-511C/T、IL-1A+4845G/T、IL-6-174G/C、IL-6-572C/G、IL-6-597G/A基因型和等位基因頻率，在廣東地區(qū)漢族健康者、中重度慢性牙周炎患者、冠心病患者、冠心病伴中重度慢性牙周炎患者中的分布情況，以期篩選中重度慢性牙周炎和冠心病共同易感基因，并分析相關(guān)危險(xiǎn)因素對(duì)易感基因的影響。結(jié)果顯示： （1）IL-1、IL-6各位點(diǎn)等位基因Ⅱ檢出率：IL-1A+

9、4845位點(diǎn)T等位基因平均檢出率為6.5%，IL-1B+3954位點(diǎn)T等位基因平均檢出率為1.7%，IL-1B-511位點(diǎn)T等位基因平均檢出率為49.5.%；IL-6-174位點(diǎn)C等位基因平均檢出率為0.5%，IL-6-597位點(diǎn)A等位基因平均檢出率為0，IL-6-572位點(diǎn)G等位基因平均檢出率為20.1%。 （2）IL-1A+4845位點(diǎn)GG、GT、TT三種基因型在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組

10、間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=3.811，p=0.702）；G、T等位基因頻率在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=3.285，p=0.350）。IL-1B+3954位點(diǎn)CC、CT兩種基因型在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=3.918，p=0.270）；C、T等位基因頻率在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重

11、度牙周炎四組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=3.849，p=0.278）。IL-6-174位點(diǎn)GG、GC兩種基因型和G、C等位基因頻率在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=0.092， p=0.993）。IL-6-597位點(diǎn)在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組中僅檢出一種GG基因型。 （3）IL-1B-511位點(diǎn)TT、CT、CC基因型在健康組、中重

12、度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=23.624，p=0.001）；T、C等位基因頻率分布在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=8.569，p=0.036）。IL-1B-511位點(diǎn)TT、CT、CC基因型在健康組、中度慢性牙周炎、重度慢性牙周炎組三組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=3.426，p=0.489）；T、C等位基因頻率分布在健康組、中度

13、慢性牙周炎、重度慢性牙周炎組三組間分布差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=1.444，p=0.486）。IL-1B-511位點(diǎn)TT、CT、CC基因型在冠心病組和非冠心病組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=20.602，p=0.000），CT+CC基因型患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)比TT型高，ORCT+CC/TT=2.876；95%CI：1.759-4.702，P=0.000；T、C等位基因頻率在冠心病組和非冠心病組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=6.907，p=0.

14、009）。攜帶等位基因C比攜帶等位基因T患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)高，ORC/T=1.411；95%CI：1.091-1.824，P=0.009。IL-1B-511基因型和等位基因頻率在吸煙或不吸煙、不飲酒、無(wú)高血壓、無(wú)高血脂、體重指數(shù)正?；虺氐那闆r下，在冠心病組和非冠心病組間分布差異有顯著性意義；在飲酒、患高血壓、患高血脂人群中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 （4）IL-6-572位點(diǎn)CC、CG、GG基因型在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠

15、心病伴中重度牙周炎四組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=15.592，p=0.016）；C、G等位基因頻率在健康組、中重度慢性牙周炎組、冠心病組、冠心病伴中重度牙周炎四組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=13.940，p=0.003）。IL-6-572位點(diǎn)CC、 CG、GG基因型在健康組、中度慢性牙周炎、重度慢性牙周炎組三組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=4.771，p=0.312）；G、C等位基因頻率分布在健康組、中度慢性牙周炎、重度慢性牙周

16、炎組三組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=1.465，p=0.481）。IL-6-572位點(diǎn)CC、CG、GG基因型在冠心病組和非冠心病組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=13.367，p=0.001），CG+GG基因型患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)比CC型高，ORGG+CG/CC=1.985；95%CI：1.370-2.876，P=0.000；G、C等位基因頻率在冠心病組和非冠心病組間分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=12.326，p=0.000），攜帶等位基因G比

17、攜帶等位基因C患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)高ORG/C=1.737； 95%CI：1.274-2.369，P=0.000。IL-6-572基因型和等位基因頻率在不吸煙、不飲酒、無(wú)高血壓、無(wú)高血脂、體重指數(shù)正?；虺氐那闆r下，在冠心病組和非冠心病組間分布差異有顯著性意義；在吸煙、飲酒、患高血壓、患高血脂人群中，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在廣東地區(qū)漢族人群中IL-1B+3954C/T、IL-1A+4845G/T、IL-6-174G/C、IL

18、-6-597G/A位點(diǎn)突變率低；IL-1B+3954C/T、IL-1A+4845G/T、IL-6-174G/C、IL-6-597G/A基因多態(tài)性與中重度慢性牙周炎和冠心病的易感性無(wú)關(guān)。IL-1B-511C/T、IL-6-572C/G基因多態(tài)性與中重度慢性牙周炎的易感性無(wú)關(guān)，與冠心病有關(guān)，但受冠心病其它危險(xiǎn)因素吸煙、飲酒、高血壓、高血脂的影響。IL-1B-511C/T、IL-6-572C/G基因多態(tài)性可能是廣東地區(qū)漢族人群發(fā)生冠心病的潛在