Kupffer細(xì)胞中NLRP3炎癥小體在非酒精性脂肪肝炎中的作用機(jī)制.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:1、證實(shí)在NASH患者肝臟Kupffer細(xì)胞(KCs)中NLRP3炎癥小體的表達(dá)。2、初步探討NLRP3炎癥小體在游離脂肪酸(FFA)激活離體KCs所致炎癥反應(yīng)中可能發(fā)揮的作用。
  方法:1、收集疑似非酒精性脂肪性肝炎患者肝臟標(biāo)本,進(jìn)行HE、MASSON染色,根據(jù)NAS積分分組:NAS積分>4分為NASH組(5例),NAS積分<3分為對(duì)照組(4例),同時(shí)進(jìn)行免疫組化檢測(cè)KCs、NLRP3、caspase-1等表達(dá)。2、通過

2、膠原酶原位灌注+Percoll細(xì)胞分離液密度梯度離心方法分離小鼠KCs,鑒定后給予FFA刺激,觀察其形態(tài)變化,Western blot檢測(cè)刺激前后NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白的表達(dá)水平明,ELISA進(jìn)一步檢測(cè)KCs分泌的IL-1β、IL-18的變化。
  結(jié)果:1、NASH患者肝臟不僅有肝細(xì)胞廣泛的脂肪變、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、膠原纖維增生,還有KCs大量的聚集與激活,同時(shí)KCs中NALP3炎癥小體及caspase-1表達(dá)也

3、明顯增加。2、離體培養(yǎng)的KCs被FFA刺激后,NLRP3(WB:0.565±0.027)、Caspase-1(WB:0.541±0.031)、ASC(WB:0.594±0.038)蛋白的表達(dá)水平較對(duì)照組NLRP3(WB:0.148±0.018)、Caspase-1(WB:0.122±0.007)、ASC(WB:0.128±0.015)明顯增加(p<0.001);IL-1β(578±36.21 pg/ml)、IL-18(197±27.16

4、pg/ml)表達(dá)水平與對(duì)照組IL-1β(26.34±7.36pg/ml)、IL-18(22.17±6.28pg/ml)也隨之增加(p<0.05)。
  結(jié)論:1.NASH患者肝臟KCs中存在NLRP3炎癥小體的表達(dá)與激活,KCs中NALP3炎癥小體的激活可能導(dǎo)致炎癥因子的釋放和肝細(xì)胞損傷,在NASH的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。2.FFA對(duì)KCs存在明顯脂毒性,F(xiàn)AA誘導(dǎo)KCs炎癥反應(yīng)可能為NLRP3介導(dǎo),繼而使NLRP3、ACS、Ca

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