龍膽苦苷基于P2x7受體-NLRP3炎癥小體調(diào)控改善酒精性脂肪蓄積的機(jī)制研究.pdf

1、目的:龍膽苦苷(Gentiopicroside，GPS)，來(lái)源于龍膽屬植物龍膽的干燥根及根莖，具有多種藥理活性。由于用小分子抑制劑調(diào)節(jié)P2x7R-NLRP3炎癥小體的激活可能是治療和預(yù)防酒精性肝病的潛在治療方法，因此，我們研究了這個(gè)過(guò)程是否會(huì)被GPS調(diào)節(jié)。
　　方法:通過(guò)用酒精（5g/kg）灌胃建立小鼠急性酒精性脂肪肝的體內(nèi)模型。然后通過(guò)用50mM乙醇處理HepG2細(xì)胞或用LPS處理RAW264.7巨噬細(xì)胞和小鼠骨髓來(lái)源的巨噬細(xì)胞

2、(bone marrow-derived macrophages，BMDM)，隨后用3mM ATP刺激，建立體外模型。
　　結(jié)果:在小鼠急性酒精性脂肪肝模型中，GPS顯著降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine Aminotransferase，ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate transaminase，AST)和積累的甘油三酯(Triglyceride，TG)的含量。GPS能夠升高LKB1/AMPK的水平，而且與膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合

3、蛋白-1（Sterol Regulatory Element-binding Protein-1，SREBP-1）和乙酰輔酶a羧化酶（Acetyl CoA Carboxylase，ACC）的下調(diào)相關(guān)。另外，GPS能恢復(fù)過(guò)氧化物酶體增殖劑激活α(Peroxisome proliferator-activated receptorα，PPARα)和ACC磷酸化的水平。GPS還能有效阻止IL-1β的產(chǎn)生和半胱氨酸蛋白酶-1（Cysteine

4、protease-1，Caspase-1）的激活以及NLRP3和P2x7R的蛋白表達(dá)。在HepG2細(xì)胞中，乙醇誘導(dǎo)脂質(zhì)積累并降低LKB1/AMPK、P-ACC和PPARα的水平以及增加Srebp1和ACC的表達(dá)。而GPS能逆轉(zhuǎn)這些變化。此外，GPS處理能抑制P2x7R蛋白水平、IL-1β蛋白分泌和Caspase-1活性的增加。P2x7R基因沉默乙醇處理的肝細(xì)胞后能增強(qiáng)P-AMPK，并減少Srebp1的表達(dá)。此外，GPS能夠通過(guò)下調(diào)P2x