桃樹類病毒鑒定及序列多樣性分析.pdf

1、桃樹在我國大部分地區(qū)廣泛栽培,據(jù)統(tǒng)計截至2006年,我國桃種植面積達(dá)677萬公頃.但是,近年來隨著桃樹產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,桃樹類病毒的侵染日益增強,導(dǎo)致斑呆、葉片上出現(xiàn)斑點或黃化等,嚴(yán)重影響果品的經(jīng)濟價值及果樹業(yè)的正常發(fā)展.目前國外報道侵染桃樹的類病毒有兩種:啤酒花矮化類病毒 (Hop stuntviroid,HSVd) 和桃潛隱花葉類病毒 (Peach latent mosaic viroid,PLMVd).PLMVd在我國桃樹上有報道,HS

2、Vd的發(fā)生情況則沒有報道. 桃樹起源于我國,調(diào)查和了解這兩種類病毒在我國發(fā)生分布情況以及我國HSVd桃樹分離株的序列變異情況對于類病毒病害檢測和防治以及進(jìn)一步研究類病毒起源、致病性等具有重要意義. 本文對采自中國北京50個桃葉樣品(L1-L50)和6個桃果實樣品(F1-F6),河北、山東、陜西、廣西、北京、新疆、福建、甘肅等地41個不同桃枝條樣品(B1-B41)共97個樣品進(jìn)行RNA抽提.經(jīng)斑點雜交、RT-PCR以及生物

3、學(xué)鑒定檢測,來自北京、陜西、新疆、福建以及甘肅的18個樣品檢測到HSVd,總檢出率達(dá)18.6﹪.三種方法均可用于檢測桃樹上的HSVd,具有一致性.經(jīng)斑點雜交檢測,88個桃樣品呈現(xiàn)PLMVd陽性,總檢出率高達(dá)90.7﹪,除了福建的樣品未檢測到之外,北京、陜西、新疆、河北、山東、廣西、甘肅的樣品都檢測到了PLMVd,而且發(fā)生率都很高. 從地理分布上看,采自我國北京、陜西、新疆以及甘肅的17個桃樣品受到HSVd和PLMVd的混合侵染,

4、而福建的桃樣品則僅檢測到HSVd,河北、廣西以及山東桃樣品僅檢測到PLMVd. 18個HSVd陽性樣品中選取9個樣品(L19,L42,L48,B6,B18,F1,F4,F5,F6)進(jìn)行HSVd克隆測序,得到22條不同HSVd核酸序列,所得序列與GenBank中已報道的HSVd序列同源性達(dá)93﹪～100﹪,可以看出,國內(nèi)桃樹HSVd分離物核酸序列變異比較小,地域和品種間核酸序列無明顯差異. 本研究完成了22條HSVd核酸序