雙探針顯色和熒光原位雜交法檢測乳腺癌HER2基因狀態(tài)和17號染色體的分析.pdf

1、乳腺癌是最常見的女性惡性腫瘤，具有較高的死亡率。聯(lián)合曲妥珠單抗(Herceptin，赫賽汀)等為主的聯(lián)合靶向化療給乳腺癌患者帶來了福音。但是曲妥珠單抗只對HER2基因擴(kuò)增或HER2蛋白過表達(dá)患者有效，同時曲妥珠單抗治療價格十分昂貴且具有雖罕見但后果極為嚴(yán)重的心臟毒害作用。因此，目前對于新診斷的乳腺癌患者，首先評估HER2狀態(tài)從而決定其是否可以接受靶向治療。免疫組化(Immunohistochemistry，IHC)是診斷HER2狀態(tài)的最

2、常用方法。但是目前美國臨床腫瘤協(xié)會及美國病理家協(xié)會(American society of ClinicalOncology/conege of American Pathologists，ASCO/CAP)數(shù)據(jù)表明高達(dá)20％的IHC結(jié)果是不準(zhǔn)確的，這個結(jié)論是通過熒光原位雜交(Fluorenscence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)驗證IHC2+的病例得出的。IHC結(jié)果易于呈現(xiàn)假陽性，一小部分會呈現(xiàn)假陰性。FI

3、SH在國際上被認(rèn)為是診斷HER2的金標(biāo)準(zhǔn)，我們通過與FISH做比較，來評估雙探針顯色原位雜交(Chromogenic in situ hybridization，CISH)法在診斷女性乳腺癌HER2基因狀態(tài)中應(yīng)用的可靠性及可重復(fù)性，同時探討17號染色體多倍體對原位雜交診斷HER2基因狀態(tài)時可能會產(chǎn)生的影響。
　　 收集乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的常規(guī)石蠟包埋標(biāo)本，分別使用FISH(146例)和雙探針CISH(115例)技術(shù)，對腫瘤標(biāo)本的H

4、ER2基因狀態(tài)進(jìn)行了檢測，并按照2007年AScO/CAP標(biāo)準(zhǔn)分別用計算HER2基因拷貝數(shù)或(和)計算HER2/17號染色體著絲粒(HER2/chromosome17 centromere，HER2/CEN17)比值的方法對結(jié)果進(jìn)行了分析。
　　 隨機(jī)選取的一例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌，3次雙探針CISH重復(fù)的結(jié)果均為陰性，平均比值為0.57±0.07，F(xiàn)ISH檢測HER2/CEN17為0.65。在83例同時做了FISH和雙探針CISH

5、的樣本中發(fā)現(xiàn)，兩種技術(shù)對HER2陰性和陽性的診斷符合率分別為92.7％和97.7％，兩者的總體符合率為96.4％；在對146例FISH結(jié)果的計數(shù)分析中發(fā)現(xiàn)，計數(shù)HER2基因拷貝數(shù)得出臨界診斷的病例數(shù)量是計數(shù)HER2/CEN17得出臨界診斷的病例數(shù)量的1.6倍(13/8)；此外，按拷貝數(shù)計數(shù)為陽性的所有病例在按比值計數(shù)時卻為陰性的不吻合率在FISH和CISH結(jié)果中分別為4.8％(3/63)和1.8％(1/57)；在FISH及雙探針CISH

6、中，按照HER2/CEN17比值計數(shù)為陽性的標(biāo)本若按照拷貝數(shù)計數(shù)為可疑的發(fā)生率分別為4.8％(3/63)及6.7％(4/60)；我們同時發(fā)現(xiàn)在FISH HER2陽性病例(HER2/CEN17)中多倍體發(fā)生率為63.5％(40/63)，顯著(p=0.002)高于陰性病例中多倍體的發(fā)生率(37.3％，28/75)。
　　 本文在國內(nèi)第一次使用雙探針CISH與FISH做比較來分析雙探針CISH對HER2診斷的可靠性。結(jié)果表明雙探針CI