酶聯免疫吸附、顯色原位雜交與免疫組化在檢測乳腺癌HER2-neu表達狀態(tài)的相關性研究.pdf

1、目的 乳腺癌原癌基因HER2/neu表達狀態(tài)的研究報告雖然較多，但由于所選的檢測標本、目的及檢測方法和試劑的不同，檢測結果相差較大，難于確切的反映HER2/neu基因在乳腺癌中的真實表達狀態(tài)。針對上述在檢測中存在的問題，我們選擇HER2/neu為研究對象，采用酶聯免疫吸附(ELISA)、免疫組化(IHC)及顯色原位雜交(CISH)分別檢測乳腺癌患者的血清及病理組織學標本中HER2/neu的表達狀態(tài)，探討如何準確檢測乳腺癌HER2

2、/neu表達狀態(tài)，分析乳腺腫瘤患者血清HER2的水平、影響因素及臨床意義；比較CISH與IHC在檢測組織HER2/neu表達狀態(tài)的一致性和差異性，探討CISH在檢測乳腺癌患者組織中HER2/neu基因表達狀態(tài)的臨床應用，為乳腺癌治療及預后判斷提供參考。 材料和方法 收集2005年11月至2006年3月在河南省腫瘤醫(yī)院住院治療的83例乳腺腫塊患者，其中轉移性乳腺癌13例；乳腺良性病變20例；可手術原發(fā)性乳腺癌50例，均經病

3、理證實。全部患者治療前晨起空腹抽取靜脈血 2ml，另外收集10例健康女性靜脈血作為對照組，分離血清保存于-70℃低溫冰箱中，并收集可手術乳腺癌患者術后石蠟病理標本。 采用ELISA方法檢測10例正常人、20例乳腺良性病變、50例早期手術乳腺癌及13例晚期轉移性乳腺癌患者血清HER2的水平，對乳癌手術組患者術后病理組織標本用IHC檢測組織HER2/neu蛋白的表達情況，探討血清HER2與淋巴結轉移、腫瘤負荷及組織HER2/neu的

4、關系；然后采用SPOT-Light HER2 CISHTM試劑盒，以CISH對40例IHC檢測分別為(+++)、(++)、(+)和(-)的術后乳腺癌石蠟病理標本進行HER2/neu基因狀態(tài)的檢測，探討二者的相關性。計量資料采用均數±標準差表示，以t檢驗進行統(tǒng)計學分析，計數資料采用x<'2>和kappa檢驗進行統(tǒng)計分析，運算全過程均在SPSS10．0軟件包內完成，以a=0．05為檢驗水準。 結果 1．健康對照組、乳腺良性病

5、變組及原發(fā)性乳癌手術組之間的血清HER2水平無明顯差異(p>0．05)，晚期轉移性乳腺癌組的血清HER2水平與前三組之間有顯著性差異(p<0．05)，晚期轉移性乳腺癌組的血清HER2陽性率與前三組相比，差異有顯著性(p<0．001．)。 2．原發(fā)性乳腺癌手術組血清HER2與原發(fā)腫瘤大小、淋巴結及組織HER2/neu表達的關系：早期乳癌手術組原發(fā)腫塊<3cm和≥3cm患者血清HER2陽性率分別為6．06％(2/33)和33．3％(

6、5/15)，差異有顯著性(P<0．05)；淋巴結轉移陽性和陰性的血清HER2陽性率分別為11．5％(3／26)和16．7％(4/24)，差異無顯著性(P>0．05)。原發(fā)性乳腺癌手術組中，20例免疫組化陽性患者中，血清HER2升高4例，30例免疫組化陰性患者中，血清HER2升高3例，差異無顯著性(P>0．05)。 3．經CISH檢測，在IHC(+++)的8例標本中，7例為HER2/neu基因擴增，1例無基因擴增；IHC(++)的

7、13例標本中，5例為HER2/neu基因擴增，8例無擴增；IHC(+)的10例標本中，2例為HER2/neu基因擴增，8例無基因擴增；IHC(-)的9例標本均無基因擴增。兩種方法對乳腺癌組織HER2/neu表達狀態(tài)的檢測有較好的一致性(kappa=0．458） 結論 1．血清HERE與腫瘤負荷密切相關，可作為重要的預后因素，在乳腺癌隨訪監(jiān)測療效觀察尤其是Herceptin治療后的療效觀察中發(fā)揮其獨到的作用。 2．