纈沙坦對(duì)LOX-1mRNA在慢性腎臟疾病大鼠腎皮質(zhì)中表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)研究血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)在慢性腎臟疾病大鼠腎皮質(zhì)中的基因表達(dá)，探討LOX-1在慢性腎臟疾病發(fā)生、發(fā)展中的作用。 方法：將48只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組和治療組，每組16只。對(duì)照組：以0.9％的生理鹽水1mL/100g的劑量給大鼠灌胃，早晚各一次。實(shí)驗(yàn)組：用濃度為1g/L的腺嘌呤混懸液，按300mg·kg-1·-1的劑量早晨灌胃；0.9％的生理鹽水1mL/100g·-1的劑量晚上灌胃。

2、治療組：用濃度為1mg/mL的腺嘌呤混懸液，按300mg·kg-1·-1的劑量早晨灌胃；用濃度為1g/L的纈沙坦混懸液，按10mg·kg-1·-1的劑量晚上灌胃。實(shí)驗(yàn)3周后：取清晨尿液約3ml，檢測(cè)尿蛋白/尿肌酐；尾靜脈取血檢測(cè)血清肌酐、尿素氮。實(shí)驗(yàn)3周后至第8周：對(duì)照組：用0.9％的生理鹽水1ml/100g·d_的劑量灌胃；實(shí)驗(yàn)組：用0.9％的生理鹽水1ml/100g·-1的劑量灌胃；治療組：用濃度為1g/L的纈沙坦混懸液，按10mg

3、·kg-1·-1的劑量灌胃。實(shí)驗(yàn)8周后：采用尾袖口法測(cè)量大鼠血壓；心臟采血檢測(cè)血清肌酐、血脂、超敏C反應(yīng)蛋白；最后腹腔麻醉，開(kāi)腹取腎，觀察腎臟外觀；取右腎腎皮質(zhì)放入液氮瓶在低溫冰箱中凍存，行實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)LOX-1mRNA的表達(dá)；收左腎：固定、石蠟包埋、3μm切片、行HE染色、觀察腎臟病理改變。結(jié)果：3周后：血清肌酐、尿素氮，尿蛋白/尿肌酐：實(shí)驗(yàn)組和治療組明顯高于對(duì)照組(p＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組和治療組無(wú)顯著性差異(p＞0.05)。8

4、周后：實(shí)驗(yàn)大鼠腎臟大體標(biāo)本觀察顯示：對(duì)照組大鼠腎臟蠶豆大小，表面光滑，質(zhì)地堅(jiān)實(shí)，色鮮紅，包膜結(jié)合緊密，不易剝離；實(shí)驗(yàn)組和治療組雙側(cè)腎臟明顯腫大，質(zhì)軟呈灰白色，有顆粒感，包膜易剝脫。剖面：對(duì)照組腎臟色澤紅潤(rùn)，腎皮質(zhì)厚度正常，腎盂、腎盞無(wú)擴(kuò)張，皮、髓質(zhì)界線清晰。實(shí)驗(yàn)組和治療組腎臟呈灰白色，腎皮質(zhì)變薄，皮髓質(zhì)界限模糊，腎盂、腎盞擴(kuò)張，大量棕黑色結(jié)晶沉積，部分腎盞、腎乳頭受壓變平甚至消失。 HE染色結(jié)果顯示：對(duì)照組腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)正常

5、。與對(duì)照組比較：實(shí)驗(yàn)組大鼠腎小球數(shù)量減少，充血，囊腔擴(kuò)大，間質(zhì)增生，透明樣變性，炎細(xì)胞浸潤(rùn)。部分腎小管擴(kuò)張，小管上皮細(xì)胞濁腫，管腔內(nèi)明顯可見(jiàn)棕黑色結(jié)晶物沉積，結(jié)晶周?chē)梢?jiàn)異物巨細(xì)胞反應(yīng)；部分腎小管破壞，萎縮消失，其中可見(jiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維組織增生；部分腎小管擴(kuò)張，其中可見(jiàn)蛋白及顆粒管型。治療組腎小球中度充血，囊腔擴(kuò)大，腎小管擴(kuò)張，部分萎縮，小管上皮細(xì)胞濁腫，間質(zhì)有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管管腔內(nèi)可見(jiàn)較多的棕黑色結(jié)晶。實(shí)時(shí)熒光PCR顯示：LOX-

6、1mRNA在慢性腎臟疾病大鼠腎皮質(zhì)中表達(dá)明顯高于對(duì)照組(p＜0.05)；纈沙坦治療后LOX-1mRNA在腎皮質(zhì)中表達(dá)明顯低于實(shí)驗(yàn)組(p＜0.05)，與對(duì)照組比較有輕微升高，但無(wú)顯著性差異(p＞0.05)?？偰懝檀肌⒏视腿?、高密度脂蛋白三組之間無(wú)顯著性差異(p＞0.05)；實(shí)驗(yàn)組血清肌酐、低密度脂蛋白、脂蛋白α、血壓、超敏C反應(yīng)蛋白明顯高于對(duì)照組和治療組(p＜0.05)；治療組肌酐、低密度脂蛋白、脂蛋白α、血壓、超敏C反應(yīng)蛋白與對(duì)照組相

7、近，兩者無(wú)顯著性差異(p＞0.05)，但血壓仍明顯升高(p＜0.05)。LOX-1mRNA在腎皮質(zhì)中的表達(dá)上調(diào)與血肌酐、低密度脂蛋白、脂蛋白α、血壓、超敏C反應(yīng)蛋白有相關(guān)性r分別為(0.698，0.829，0.724，0.816，0.740p＜0.05)，與總膽固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白無(wú)明顯相關(guān)性r分別為(0.344，0.103，0.163，p＞0.05)。 結(jié)論：1.LOX-1mRNA在慢性腎臟疾病大鼠腎皮質(zhì)中表達(dá)明顯上調(diào)