NF-κB、TNF-α和小膠質(zhì)細胞在無創(chuàng)肢體缺血后處理腦保護中的作用.pdf

1、目的：本實驗在建立大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型基礎(chǔ)上，研究NF-κB、TNF-α和小膠質(zhì)細胞在無創(chuàng)性遠端肢體缺血后處理腦保護機制中的作用。
　　方法：健康雄性SD大鼠，體重250～300g，隨機分為3組(eachn=15):假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（I/R組）和無創(chuàng)遠端缺血后處理組(NRIPoC組)。I/R組參照Longa制作MCAO模型方法制備局灶性腦缺血再灌注損傷模型，阻斷大鼠右側(cè)大腦中動脈90min后施行再灌注

2、。Sham組除不插入栓線外，其他手術(shù)操作步驟同I/R組。NRIPoC組建立局灶性腦缺血再灌注損傷模型方法同I/R組，在大腦中動脈再灌注后立即行右側(cè)下肢加壓缺血5min/再灌注5min共3次循環(huán)后持續(xù)恢復右下肢血流。I/R組和NRIPoC組于大腦中動脈再灌注后24h，Sham組于手術(shù)完成后24h分別對各組大鼠進行神經(jīng)功能障礙評分，評分后處死大鼠，進行TTC染色測定腦梗死容積; HE染色及Nissl染色分別觀察缺血半影區(qū)腦組織細胞形態(tài)及神經(jīng)

3、細胞存活情況。采用Iba1標記小膠質(zhì)細胞，免疫組化法觀察小膠質(zhì)細胞形態(tài)和數(shù)量的變化。免疫組化和Western blot法測定NF-κB、TNF-α的表達。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠腦缺血再灌注24h后，NRIPoC組腦梗死容積比I/R組腦梗死容積顯著減小(P＜0.05)。
　　2.HE染色和Nissl染色:HE染色顯示I/R組和NRIPoC組腦缺血中心區(qū)均出現(xiàn)細胞壞死，腦缺血半影區(qū)神經(jīng)細胞數(shù)目減少，體積減小，核固縮，染

4、色質(zhì)濃縮、邊聚。而NRIPoC組細胞損傷程度較I/R組減輕。NRIPoC組尼氏體數(shù)量較I/R組顯著增加(P＜0.05)。
　　3.缺血半影區(qū)NF-κB和TNF-α表達:與Sham組相比，I/R組和NRIPoC組缺血半影區(qū)NF-κB和TNF-α表達免疫組化法及Western blot法均顯著升高(P＜0.05)，但NRIPoC組NF-κB和TNF-α表達較I/R組表達降低(P＜0.05)。
　　4.小膠質(zhì)細胞:與Sham組相比

5、，I/R組和NRIPoC組小膠質(zhì)細胞數(shù)目顯著增加(P＜0.05)。NRIPoC組小膠質(zhì)細胞數(shù)目比I/R組增加(P＜0.05)。
　　5.腦缺血再灌注24h后，NRIPoC組神經(jīng)功能障礙評分中位數(shù)較I/R組下降，但I/R組和NRIPoC組神經(jīng)功能障礙評分差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.無創(chuàng)性遠端肢體缺血后處理的腦保護機制可能與降低NF-κB和TNF-α表達，減輕腦內(nèi)炎癥反應有關(guān)。
　　2.小