TNF-a、NF-κβ在肝臟缺血再灌注損傷中的作用.pdf

1、目的：構(gòu)建大鼠失血性休克復(fù)蘇肝臟缺血再灌注損傷模型，用免疫組化方法探討TNF-α、NF-κβ在肝臟缺血再灌注損傷中的作用。
　　 方法：30只清潔級(jí)SD大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組（A組）、休克組（B組）、失血性休克/復(fù)蘇（C組）亦稱模型組。A組大鼠麻醉后,測(cè)平均動(dòng)脈壓（MAP）正常后直接處死采集大鼠肝組織。B組經(jīng)股動(dòng)脈穿刺置管放血，維持MAP為（35±5mmHg）持續(xù) 90min后處死采集大鼠肝組織。C組大鼠麻醉后，經(jīng)股動(dòng)脈穿刺置管

2、放血，維持MAP為（35±5mmHg）維持90min，回輸自體血液進(jìn)行復(fù)蘇，維持MAP 80-100mmHg，制作失血性休克復(fù)蘇模型，復(fù)蘇6h后處死采集大鼠肝組織。通過(guò)HE染色了解肝組織病理形態(tài)學(xué)改變， SP免疫組化測(cè)定各組大鼠肝臟TNF-α、NF-κβ表達(dá)情況，并采用全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)（Image-proplus 6.0）計(jì)算各組陽(yáng)性區(qū)域積分吸光度。應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±S）表示，成組資料采用單因

3、素方差分析，進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，各組間相互比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：A組HE染色肝組織結(jié)構(gòu)及形態(tài)正常，B組見(jiàn)部分肝細(xì)胞空泡樣變性，損傷較輕，C組肝組織損傷較最重，肝小葉結(jié)構(gòu)不清，肝細(xì)胞出現(xiàn)明顯的空泡變性，肝竇淤血，并見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞滲出及肝臟巨噬細(xì)胞聚集。免疫組化結(jié)果顯示：C組表達(dá)TNF-α、NF-κβ最高,二者平均積分吸光度值分別為（0.197±0.026，0.131±0.035）；B組的